Aplicación de PCR a partir de cultivo en la identificación de subespecies del complejo Mycobacterium Tuberculosis
The use of culture-based PCR for the identification of subspecies of the mycobacterium tuberculosis complex
Med. infant; 30 (2), 2023
Publication year: 2023
Los métodos diagnósticos clásicos de tuberculosis (TB)
se basan en la utilización de baciloscopía y cultivo. La
identificación del agente etiológico desde la positivización del
cultivo requiere entre 10 y 15 días, mientras que el empleo
de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) disminuye
el tiempo a 24 h, lo que permite no solo identificar las
subespecies del complejo Mycobacterium tuberculosis (CMTB)
sino también diferenciarlas de otras especies ambientales
clínicamente importantes (MOTT) facilitando el diagnóstico
y tratamiento. El objetivo del presente trabajo fue determinar
la utilidad de la PCR en la identificación temprana de las
micobacterias pertenecientes al CMTB, a partir de cultivos
positivos, de pacientes con sospecha de TB, atendidos en
un hospital pediátrico de alta complejidad, durante un período
de cuatro años. A cada muestra, se le realizó baciloscopía
y cultivo en medio líquido. A los cultivos positivos, una
inmunocromatografía lateral (TBIDR) y luego PCR. El 4,6% del
total de muestras (510/11.162) pertenecientes a 198 pacientes
presentó cultivos positivos. Cuatrocientos veintiseis (84%)
correspondieron a muestras respiratorias. El rendimiento de
la baciloscopía directa fue del 41% (194/470). Cuatrocientos
treinta y ocho (86%) resultaron M. tuberculosis, 21 (4%)
Mycobacterium bovis, 7 (1%), M. bovis-BCG y 44 (9%)
MOTT. La utilización de medios de cultivos líquidos junto
con el empleo de PCR favorecen una rápida orientación
microbiológica y constituye una estrategia útil para optimizar
el manejo clínico de estas infecciones, desde el punto de
vista terapéutico y epidemiológico, especialmente en pediatría (AU)
Classical diagnostic methods for tuberculosis (TB) are based
on the use of smear microscopy and culture. The identification
of the etiological agent from positive culture requires 10 to 15
days, while the use of the polymerase chain reaction (PCR)
reduces the time to 24 h, which allows not only to identify
the subspecies of the Mycobacterium tuberculosis complex
(MTC) but also to differentiate them from clinically important
environmental mycobacteria other than tuberculosis (MOTT),
facilitating diagnosis and treatment. The aim of this study was
to determine the usefulness of PCR in the early identification of
mycobacteria belonging to the MTC, from positive cultures of
patients with suspected TB seen in a pediatric tertiary hospital
over a 4-year period. For each sample, smear microscopy and
culture in liquid medium was performed. Positive cultures were
subjected to lateral immunochromatography (TBIDR) and then
PCR. Of the total number of samples (510/11,162) belonging to
198 patients, 4.6% showed positive cultures; 426 (84%) were
respiratory samples. The direct smear microscopy yield was
41% (194/470). Overall, 438 (86%) were found to be M. tuberculosis, 21 (4%) Mycobacterium bovis, 7 (1%), M. bovis-BCG,
and 44 (9%) MOTT. The use of liquid culture media together
with the use of PCR favors a rapid microbiological orientation
and is a useful strategy to optimize the clinical management of
these infections, from a therapeutic and epidemiological point
of view, especially in children (AU)