Validation of a method employing liquid chromatography to identify and quantify glycomacropeptide of casein in raw milk

Murcia, Fernando; Bernal, Orlando; Guzmán, Jenifer; Arias, Willinton; Morales, María

Background:

The information on official testing methods, or regulatory methods in Colombia to test whey in milk is limited; this restriction of information goes against the possibility of mitigating the risk of food fraud.

Objectives:

The validation of an HPLC method to determine casein glycomacropeptide (c-GMP), a protein that countries such as Brazil, Spain, and Ecuador have used as an indicator of raw milk adulteration with whey, was carried out.

Methods:

A 10mL sample of raw milk is precipitated with 24% TCA using ultrasound, a process followed by filtration. The collected fraction ensured the separation of c-GMP and then injected into the liquid chromatography.

Results:

A 30 minutes analysis allowed the determination of c-GMP with a retention time of 12.9 ± 0.5 minutes.

The performance characteristics method in the validation exercise were:

recovery percentage 99.97%, linearity R2> 0.95; % RSD accuracy <5.3%. Conclusion, the method exhibits desirable attributes for the intended purpose

Antecedentes:

En Colombia la información de dominio público en metodologías de análisis de lactosuero en leche es limitada, restringiendo la posibilidad de acceder a ellas para mitigar el riesgo de fraude alimentario.

Objetivos:

Se realizó validación de un método por HPLC para determinar en leche cruda c-GMP, proteína usada como indicador de adulteración en países como Brasil y Ecuador.

Metodos:

Una muestra de 10mL de leche cruda es precipitada con TCA al 24% empleando ultrasonido, proceso seguido por filtración. La fracción recolectada aseguró la separación del c-GMP para luego inyectar al cromatógrafo líquido.

Resultados:

La determinación de c-GMP permitió el análisis en 30 minutos con tiempo de retención de 12,9 ± 0,5 minutos.

Las características de desempeño del método en el ejercicio de validación fueron:

porcentaje de recuperación 99,97%, linealidad R2>0,95; precisión %RSD< 5,3%.

Conclusión:

el método al final del ejercicio exhibe atributos para el fin previsto