Uso de PCR digital para definir terapéuticas específicas y seguimiento en enfermedades autoinflamatorias
Use of digital PCR to define specific therapeutics and follow-up in autoinflammatory diseases
Med. infant; 30 (2), 2023
Publication year: 2023
Las enfermedades autoinflamatorias (AIDs) son un grupo
heterogéneo de desórdenes monogénicos o poligénicos, con
características de disregulación inmune innata y/o adaptativa,
cuyo mecanismo central es la autoinflamación pero también
pueden presentarse con autoinmunidad e inmunodeficiencia.
En estos últimos años el desarrollo de las tecnologías de
secuenciación masiva han provocado una explosión en el
descubrimiento de nuevos genes responsables de AIDs
monogénicas. Esto remarca la importancia de implementar
este tipo de estudios para llegar a un diagnóstico definitivo
sobre todo en este grupo de patologías genéticamente muy
diversas donde los fenotipos clínicos se solapan. Sin embargo,
dada la presencia de variantes de significación incierta (VUS),
los resultados pueden no ser concluyentes planteándose la
necesidad de desarrollar pruebas funcionales para determinar
la patogenicidad de dichas variantes genéticas. En nuestro
grupo de trabajo estamos aplicando la PCR digital en gotas
(ddPCR), una técnica cuantitativa de 3era generación
altamente sensible, especifica y reproducible que no necesita
de curvas de calibración, para desarrollar pruebas funcionales
que permitan no sólo reclasificar variantes VUS para lograr
diagnósticos definitivos sino también estudiar los mecanismos
responsables de las principales AIDs que permitan una
estratificación de las terapéuticas especificas a aplicar y de
esta manera poder contribuir al diagnóstico, tratamiento y
seguimiento de nuestros pacientes en forma personalizada.
(AU)
Autoinflammatory diseases (AIDs) are a heterogeneous group
of monogenic or polygenic disorders, with characteristics of
inborn and/or adaptive immune dysregulation, whose central
mechanism is autoinflammation but may also present with
autoimmunity and immunodeficiency. In recent years the development of massive sequencing technologies has led to an
exponential increase in the discovery of new genes responsible
for monogenic AIDs. This emphasizes the importance of the
implementation of this type of studies to make a definitive
diagnosis, especially in this group of genetically very diverse
diseases with overlapping clinical phenotypes. However, given
the presence of variants of uncertain significance (VUS), the
results may not be conclusive, raising the need to develop
functional tests to determine the pathogenicity of these genetic
variants. In our working group we are applying droplet digital
PCR (ddPCR), a highly sensitive, specific and reproducible
third generation quantitative technique that does not require
calibration curves, to develop functional tests that allow not
only to reclassify VUS variants to achieve definitive diagnoses
but also to study the mechanisms responsible for the main
AIDs that allow for the stratification of specific treatments to
be used and thereby contribute to the individualized diagnosis,
treatment, and follow-up of our patients (AU)