Foram analisadas a incidência e a multi-resistência a drogas antimicrobianas em bactérias patogênicas isoladas de 750 amostras de leite de vacas com mastite sub-clínica, na regiäo-centro oeste do Estado de Säo Paulo. Os microorganismos do gênero Staphylococcus (75,8 por cento), principalmente representados pelos S. aureus e S. epidermes, e a Escherichia coli (7,1 por cento) foram as bactérias mais freqüentemente isoladas. A maioria dos agentes etiológicos apresentou-se em cultura pura, embora associaçöes de microorganismos tenham sido encontradas em algumas amostras. A resistência múltipla a drogas antimicrobianas (penicilina, ampicilina, dicloxacilina, estreptomicina, tetraciclina e oxacilina) foi observada somente entre bactérias Gram negativas e em algumas linhagens de S. aureus (39,9 por cento). Os demais agentes bacterianos Gram positivos demonstraram sensibilidade às drogas testadas. Os problemas conseqüentes da resistência múltipla a drogas constituem um obstáculo à terapêutica e de difícil soluçäo, principalmente através de programas de controle a curto prazo