O objetivo desse estudo foi avaliar a eficiência da meia dose de PGF2alfa no protocolo de sincronização da ovulação (GnRH/PGF2alfa/GnRH) para inseminação artificial em tempo fixo em bubalinos. Foram utilizadas 262 búfalas ( 40 dias pós-parto), divididas em dois grupos (Grupo 1, n = 125, GnRH/ ½ dose de PGF2alfa/GnRH; Grupo Controle, n = 137, GnRH/PGF2alfa/GnRH). Os animais do Grupo 1 receberam 25 mg de GnRH IM (Lecirelina, Gestran-plus®) e, após sete dias, receberam 75mg de PGF2alfa IM (d-cloprostenol, Preloban®). Dois dias após a aplicação da PGF2alfa, esses animais receberam 25mg de GnRH IM (Lecirelina). Os animais do Grupo Controle receberam o mesmo tratamento, à exceção da dose de PGF2alfa (150mg de d-cloprostenol, Preloban®). Todos os animais foram inseminados em tempo fixo 16 horas após a segunda aplicação de GnRH. Foram colhidas amostras de sangue de 35 búfalas do Grupo 1 e de 30 do Grupo Controle nos dias da aplicação de PGF2alfa e da segunda dose de GnRH. As colheitas de sangue foram realizadas para avaliar as concentrações plasmáticas de progesterona. Os resultados demonstraram que a taxa de concepção não foi influenciada pela dose de PGF2alfa (P>0,05). As taxas de concepção dos Grupos 1 e Controle foram de 48,00 por cento (60/125) e 40,90 por cento (56/137), respectivamente. Observou-se que 88,60 por cento (n = 35) das búfalas do Grupo 1 e 90,00 por cento (n = 30) do Grupo Controle apresentaram luteólise 48 horas após a aplicação de PGF2alfa (P>0,05). Em conclusão, os resultados indicaram que ambos tratamentos proporcionaram aceitáveis taxas de concepção. Dessa forma, a dose recomendada de PGF2alfa pode ser reduzida pela metade no protocolo de sincronização da ovulação para inseminação artificial em tempo fixo em bubalinos.