Objetivo – Investigar a prevalência da bactéria Pseudomonas aeruginosa em amostras de água e superfície anteriormente coletadas em uma empresa privada, localizada no noroeste do estado de São Paulo e determinar a suscetibilidade desse microrganismo frente a diferentes antimicrobianos. Métodos – Foram coletadas amostras de água e swab de superfície em um incubatório de matrizes situado no noroeste do estado de São Paulo. Para o isolamento, foram realizadas técnicas de semeadura e posteriormente a técnica de identificação do pigmento piocianina através da luz ultravioleta. Quanto ao perfil de resistência, as cepas foram submetidas a testes de antibiogramas com os antibióticos enrofloxacina, ciprofloxacina, norfloxacina, colistina, sulfametazol e trimetropim, fosfomicina, gentamicina, neomicina, estreptomicina, tetraciclina, doxiciclina, amoxilina, ceftiofur para verificação da susceptibilidade frente aos antibióticos. Resultados – Foram analisadas o total de 402 amostras, sendo que 21 delas apresentaram positividade para P. aeruginosa. As amostras analisadas apresentaram resistência ou resistência intermediária a pelo menos uma classe de antimicrobiano testado. Conclusões – Os resultados obtidos no presente trabalho mostram a capacidade que a Pseudomonas aeruginosa tem de sobreviver em locais úmidos, com condições mínimas de nutrientes, mesmo quando submetida a higienização constante, além do amplo perfil de resistência observado frente aos diversos fármacos empregados no tratamento das infecções causadas por este patógeno.