El citomegalovirus (CMV) tiene especial relevancia en los recién nacidos por constituir la primera causa de infección congénita de origen viral, determinando diversas consecuencia en ellos. Actualmente, se dispone de una gran variedad de métodos para establecer el diagnóstico de esta infección, los cuales presentan ventajas y desventajas que delimitan su uso. El objetivo de este trabajo, fue determinar la incidencia de infección congénita por citomegalovirus a través del aislamiento viral clásico en cultivos celulares mediante la detección de inmunoglobulina M (IgM) en sangre de cordón umbilical. Se estudiaron 86 recién nacidos del Hospital Félix Bulnes a través del aislamiento viral, desde muestras de orina obtenidas en los primeros días de vida, las que fueron inoculadas en cultivos celulares. Al mismo tiempo, se realizó en 173 casos, el análisis de la sangre de cordón umbilical por ELISA, para investigar la presencia de IgM anti CMV. Se detectaron 5 niños positivos (2,5 por ciento), del total de niños estudiados por una de ambas técnicas y en sólo uno de ellos el diagnóstico fue positivo por los dos métodos. De las 86 muestras de orina informadas, en 4 (4,65 por ciento) se aisló el virus y de los 173 sueros en 2 (1,15 por ciento) se detectó IgM. Se aprecia una mayor sensibilidad del islamiento viral clásico en cultivos celulares, en relación a la detección de IgM anti CMV en el diagnóstico de la infección congénita por CMV