Se evaluó la viabilidad de leucocitos polimorfonucleares neutrófilos (PMN) expuestos a alfa hemolisina (Hly A) de E. coli y se detectó, por citometría de flujo, la fluorescencia que células permeabilizadas al propidio manifiestan con este último intercalado en el ADN celular. El sobrenadante hemolítico causó flourescencia en PMN de manera directamente proporcional a la dosis hemolítica, no así los sobrenadantes control no hemolíticos. A dosis menores a 0,5 HU50ml las céluas excluyeron propidio manteniendo viabilidad, aunque aumentaron de manera leve y temporal su tamaño, y volvieron al nivel basal en término de 1 hora, surgiriendo que existe daño en membrana sin entrada de propidio, y que se presenta recuperación celular de dichas lesiones, al menos a corto plazo. La fluorescencia de PMN disminuyó luego de 15 minutos de exposición, fenómeno que se previno mediante la quelación de Ca+2 extracelular con N,N,N`,N`- tetraacetato (EGTA); ello indica que es la entrada del calcio a la célula la causante de la pérdida de señal. La disminución o quelación de Ca+2 extracelular incrementó la fluorescencia, pero solo la quelación simúltanea de Ca+2 externo e interno la mantuvo inalterada. Se concluye que la entrada de Ca+2 a la célula activa mecanismos que disminuyen la fluorescencia inicial; que niveles bajos o quelación de Ca+2 extracelular facilitan la entrada de propidio, lo que incrementa la fluorescencia, y que la disminución de la señal se evita solo si el Ca+2 intracelular y el extracelular se encuentran quelados. Los hallazgos de este estudio, en conjunto con datos de otros autores, se toman como base para formular una cadena hipotética de acontecimientos que explica las observaciones citométricas en PMN expuestos Hly A, con énfasis en el significado del aumento de tamaño celular en ausencia de entrada de propidio a la célula. (Rev Cost Cienc Med 2000; 21(3-4): 127-39).

Palabras clave:

leucocito polimorfonuclear, alta hemolisina, citometría de flujo, fluorescencia.