Se estudio la presencia de penicilina en 100 muestras de leche pasteurizada de tipo comercial y 155 muestras de leche no pasteurizada proveniente de las regiones de Coronado, Irazu, Poas, San Carlos y Los Santos, Costa Rica. Se empleo el metodo de difusion en agar utilizando discos de papel impregnados con basillus Subtilis ATCC 6633 como bacteria indicadora. Los resultados obtenidos demuestran que el 88% de las muestras de la leche de tipo comercial, y el 64.5% de las muestras de leche no tratadas contenian penicilina. El 5.2% de estas ultimas presento concentraciones superiores a 0,01 U/ml. Las regiones que presentaron el mayor numero de muestras positivas fueron los Santos y San Carlos; y en las muestras provenientes de Coronado, Poás e Irazú, se encontro las concentraciones mas altas del antibiotico