Semen bovino sexado congelado-descongelado en producción de embriones in vitro
In vitro embryo production with frozen-thawed bovine semen sexed
Int. j. morphol; 35 (1), 2017
Publication year: 2017
El objetivo de este trabajo fue evaluar la fertilidad in vitro del semen bovino sexado (SX) vs. no sexado (NS) congelado-descongelado de dos toros Holstein, cada uno de la misma partida. Determinar el sexo de las crías significa un avance importante para la producción. El citómetro de flujo separa los espermatozoides X e Y por diferencia de ADN (4 % mayor en X), con 90 % de efectividad. Los complejos ovocito-cúmulus (COC) se obtuvieron de folículos de 2 a 8 mm de ovarios de frigorífico, se cultivaron para maduración 22 h en TCM-199 + 5 % de SFB + 10 % licor folicular bovino (LFB), en gotas de 100 µl, cubiertos con aceite mineral, en incubadora (38,5 C, 5 % CO2 y 95 % de humedad). Posmaduración, se formaron al azar 4 grupos de COC los cuales fueron inseminados con NS y SX de los toros 1 y 2. Los COC se incluyeron en gotas de 100 ml a razón de 10 COC por gota de semen capacitado a una concentración de 2x106 espermatozoides/ml en todos los grupos, incubados durante 6 h. Posteriormente se cultivaron en CR1aa + 5 % SFB, en incubadora. A las 48 h se evaluó el clivaje y al día 7 el desarrollo embrionario. Los resultados fueron analizados con el Test de c2. Se encontró diferencias significativas en el toro 1 en el desarrollo embrionario a favor del NS (p<0,05). En el toro 2 no se encontró diferencias significativas en el clivaje ni en el desarrollo (p<0,05).
The objective of this study was to evaluate the in vitro fertility of sexed (SX) vs. non-sexed (NS), frozen-thawed bovine semen from two Holstein bull, from the same batch each one. Offspring sexing represents an important advance for livestock production. Flow cytometry separates X and Y spermatozoa by difference in DNA (4 % greater in X) with 90 % effectiveness. Cumulus-oocytes complexes (COC) were obtained from follicles measuring between 2 and 8 mm collected from slaughterhouse ovaries; they were then cultured 22 h for maturation in TCM-199 + 5 % BFS + 10 % bovine follicular fluid (BFF) in 100 µl drops with mineral oil, in incubator (38.5 C, 5% CO2 and 95 % humidity). Postmaturation, 4 groups were randomly formed and inseminated with NS and SX of the 1 and 2 bulls, including them in 100 µl drops at 10 COC per drop of capacitated semen diluted to a concentration of 2x106 sperms/ml in all groups, incubated during 6 h. They were then cultured in CR1aa + 5% BFS in an incubator. At 48 h cleavage and at day 7 embryonic development, were assessed. Results were analyzed with c2 square Test. There were significant differences (P<0.05) in the embryonic development in bull 1, grater in NS. In bull 2 there were not significant differences in cleavage neither in embryo development.