Este estudo longitudinal investigou o efeito da ausência de junção amelocementária (JAC) na variação de pH extrarradicular durante clareamento interno. Dividiram-se 30 incisivos humanos extraídos em dois grupos experimentais (n = 12) e um grupo controle (n = 6). Nos espécimes do grupo experimental I, as junções amelocementárias foram mantidas intactas; no grupo experimental II, as mesmas foram completamente removidas por desgaste com ponta diamantada antes da inserção intracoronária de peróxido de hidrogênio a 30% (Magistral Pharma). No grupo controle, as câmaras pulpares foram repletas de soro fisiológico. Em cada intervalo experimental de 0, 24, 72, 96, 156, 192 e 270 horas, mensurava-se o pH extrarradicular por meio da sonda de um peagômetro (Micronal®) inserida na água destilada em que os espécimes eram imersos e, imediatamente, o agente clareador era renovado. A análise de variância a dois critérios revelou para o grupo II (JAC ausente) os menores valores de pH (4,3 ± 0,16), estatisticamente diferentes do grupo controle (7,1 ± 0,20) nos intervalos de 156, 192 e 270 horas, e do grupo I (5,9 ± 0,14) no período de 270 horas (p menor ou igual a 0,05). Concluiu-se que a ausência de união entre cemento e esmalte intensificou a redução de pH no meio extrarradicular somente após 270 horas de clareamento interno.