Análise comparativa dos cimentos MTA cinza e branco associados ao álcool isopropílico
Comparative analysis of gray and white MTA associated with isopropyl alcohol
Publication year: 2016
Theses and dissertations in Portugués presented to the Universidade do Estado do Rio de Janeiro. Faculdade de Odontologia to obtain the academic title of Doutor. Leader: Fidel, Rivail Antonio Sergio
O objetivo deste estudo ex vivo foi investigar e comparar os efeitos antibacterianos, a citotoxicidade, a adaptação marginal e a capacidade seladora do agregado trióxido mineral (MTA), branco e cinza (Angelus, Londrina, Brasil), quando combinados com água destilada ou álcool isopropílico. Os efeitos antibacterianos de ambas as formulações foram avaliados através do teste de difusão em agar utilizando Staphylococcus aureus (ATCC25923) e Pseudomonas aeruginosa (ATCC27853) para a seleção da concentração de escolha. A geração das espécies reativas do oxigênio (ERO) foi analisada, primeiramente, utilizando cepas de Escherichia coli proficiente (AB1157) e triplo mutante (BW535), deficiente nos mecanismos de reparo. A geração de ERO também foi analisada através da degradação plasmidial (método de eletroforese) e com a utilização da sonda DCF. A geração das espécies reativas do nitrogênio (ERN) foi avaliada através da sonda DAF. A citotoxicidade dos eluatos dos cimentos foi avaliada pelo MTT, com células L929. A adaptação marginal foi feita através da microscopia eletrônica de varredura (MEV). A capacidade seladora foi realizada através de ensaios de infiltração bacteriana. Os resultados mostraram que a incorporação do isopropanol ao MTA aumentou os halos de inibição no modelo Gram-positivo (S. aureus-ATCC25923) (P <0.05). A adição de isopropanol 70% aos cimentos de MTA branco e cinza aumentou a atividade antimicrobiana para E. coli selvagem (AB1157) e triplo mutante (BW535) (P <0.0001). Não ocorreu a total degradação do DNA plasmidial para as amostras de MTA branco e cinza manipuladas com isopropanol 70%. As amostras de MTA branco e cinza manipuladas de acordo com o fabricante geraram significativamente mais espécies reativas do oxigênio (sonda DCF) (P <0.0001 e P =0.0002) e do nitrogênio (sonda DAF) (P =0.0002 e P =0.0003) do que as manipuladas com isopropanol 70%. Os cimentos manipulados com água destilada foram mais citotóxicos do que a associação com solução de isopropanol 70% (P <0.05). A análise ao MEV mostrou melhor adaptação ao preparo nas amostras com o isopropanol 70%, entretanto o ensaio de infiltração bacteriana ex vivo com Enterococcus faecalis (ATCC29212), não mostrou diferença estatística para as amostras manipuladas com isopropanol ou com água (P >0.05). Podemos concluir que a manipulação com isopropanol melhorou a atividade antimicrobiana do MTA tornando-o menos citotóxico, sem alterar a capacidade seladora.
The aim of this study was to investigate and compare the antibacterial effects, cytotoxicity, marginal adaptation and sealing ability of mineral trioxide aggregate (MTA), white and gray (Angelus, Londrina, Brasil), when combined with distilled water or isopropyl alcohol. The antibacterial effects of both formulations were evaluated by agar diffusion method using Staphylococcus aureus (ATCC25923) and Pseudomonas aeruginosa (ATCC27853) for selecting the suitable concentration of isopropyl alcohol. The antimicrobial mechanism by the generation of reactive oxygen species (ROS) was first analyzed using Escherichia coli strains: proficient (AB1157) and triple mutant (BW535), deficient in the repair mechanisms. The ROS generation was also analyzed by degradation of DNA plasmid (electrophoresis method) and with the DCF probe. The generation of reactive nitrogen species (RNS) was assessed by DAF probe. The cytotoxicity of the eluates was assessed by MTT test, with L929 cells. The marginal adaptation was evaluated by scanning electron microscopy (SEM). The sealing ability was performed using bacterial leakage assay. The results showed that the incorporation of isopropanol to MTA increased the inhibitory haloes in Gram-positive model (S. aureus-ATCC25923) (P <0.05). Adding 70% isopropanol to white and gray MTA cements increased antimicrobial activity against both E. coli wild (AB1157) and triple-mutant (BW535) strains (P <0.0001). The DNA plasmid was not completely degraded for the samples of white and gray MTA manipulated with 70% isopropanol. The white and gray MTA samples, handled according to the manufacturer, generated significantly more ROS (DCF probe) (P <0.0001 e P =0.0002) and RNS (DAF probe) (P =0.0002 e P =0.0003) than that manipulated with 70% isopropanol. The cements handled with distilled water were more cytotoxic than when associated with isopropanol solution 70% (P <0.05). The SEM analysis showed better adaptation to the cavity prepares when the samples were filled with MTA with 70% isopropanol, however the ex vivo bacterial infiltration test with Enterococcus faecalis (ATCC29212), was not statistically different from samples manipulated with isopropanol or water (P >0.05). We can conclude that the manipulation with isopropanol improved the antimicrobial activity of the MTA rendering less citotoxicity, without altering the sealing ability.