Avaliação da IL-33 no mecanismo de inflamação induzido pelo Mycobacterium leprae: possíveis implicações na regulação das respostas imune inata e adaptativa

Santos, Jéssica Brandão dos

A IL-33 é uma citocina produzida por células endoteliais e epiteliais após danos que levam ao processo de necrose e vem sendo sugerida como uma alarmina tecidual. Os efeitos biológicos da IL-33 são mediados pelo seu receptor ST-2 presente na superfície de diversos tipos celulares como leucócitos, assim como a forma solúvel (sST-2) que pode regular os níveis de IL-33 livre no sangue. A IL-33 atua na polarização de respostas do tipo 2 e na migração de neutrófilos, regulando os níveis de CXCR2. Um dos aspectos mais intrigantes da hanseníase é a variedade de manifestações clínicas apresentadas pelos pacientes. O tipo de forma clínica apresentada é diretamente correlacionado com a resposta imune celular. A relação entre os níveis de IL-33 e as diferentes formas clínicas da hanseníase nunca foi investigada.

Nosso objetivo geral foi investigar mecanismos moleculares envolvidos no recrutamento e polarização de neutrófilos durante a hanseníase e os objetivos específicos foram:

(1) avaliar os níveis séricos de IL-33, (2) e sST-2 em pacientes com hanseníase, (3) correlacionar os níveis séricos de IL-33 com sST2, (4) Avaliar a produção de IL-33 e ST-2 em lesões de pele de pacientes com hanseníase, (5) avaliar a expressão de CD11b, CD62L, CD49d e CXCR2 em neutrófilos circulantes de pacientes com hanseníase e (6) avaliar a expressão de IL-8 em lesões de pele de pacientes durante o ENH e após 7 dias do início de tratamento com Talidomida. Para atingir os nossos objetivos, pacientes com hanseníase foram classificados clinicamente segundo critérios de Ridley e Jopling 1966 e agrupados da seguinte forma: (i) pacientes paucibacilares/PB (TT e BT), (ii) multibacilares/MB (BL e LL), (iii) pacientes com reação do tipo 1 (RR) e (iv) pacientes com reação do tipo 2 (ENH). Soro, lesões de pele e neutrófilos circulantes foram utilizados neste estudo

As proteínas IL-33 e sST-2 foram analisadas por ELISA e western blotting em amostras de soro e pele, respectivamente. O perfil fenotípico de neutrófilos foi avaliado por citometria de fluxo multiparamétrica utilizando-se anticorpos contra os alvos descritos no objetivo 5. Análises dos níveis proteicos de IL-33 e ST-2 em lesões de pele revelaram que pacientes MB possuem níveis aumentados tanto de IL-33 quanto de ST-2 quando comparados com pacientes PB. Além disso, pacientes MB exibiram níveis séricos elevados de IL-33 quando comparados com PB e esse achado foi correlacionado com o índice baciloscópico. Durante os episódios reacionais, os níveis de IL-33 permaneceram elevados em ENH, entretanto pacientes RR apresentaram níveis baixos. Os níveis séricos de sST-2 não foram alterados entre os diferentes grupos, porém a razão IL-33:sST-2 revelou que pacientes MB e ENH possuem níveis mais altos de IL-33 livre. Houve aumento da expressão de CD11b em neutrófilos de pacientes PB quando comparados aos neutrófilos de pacientes MB, revelando um perfil de ativação maior nos pacientes PB. Em contraste, neutrófilos MB apresentaram aumento na expressão de CD62L e CD49d quando comparados com neutrófilos PB, sugerindo que neutrófilos MB possam contribuir na angiogênese e estariam aptos para migrarem para o tecido durante o aparecimento súbito do quadro de ENH. Não houve diferença na expressão de CXCR2 quando comparamos neutrófilos PB versus MB, podendo justificar a ausência de neutrófilos em lesões de pele PB ou MB. Entretanto, neutrófilos circulantes de pacientes ENH apresentam baixos níveis de CD62L, CD49d e CXCR2 quando comparados com pacientes MB, sugerindo que estas moléculas podem ser importantes para o recrutamento de neutrófilos para lesões de pele, uma vez que a presença de neutrófilos em lesões ENH é um marco histológico específico dessa condição Em conjunto, os nossos resultados contribuem para o melhor entendimento dos mecanismos celulares e moleculares envolvidos na imunopatogênese da hanseníase. (AU)