Identificação de proteínas imunodominantes provenientes dos subgêneros Viannia e Leishmania como potenciais candidatos vacinais pan específicos no controle das leishmanioses

Oliveira, Prisciliana Jesus de

As leishmanioses são causadas por cerca de 20 espécies de Leishmania e se apresentam em diversas formas clínicas, que podem variar de branda a muito grave. Elas afetam milhões de pessoas e até então não existem medidas de controle eficazes. Assim, a imunização da população seria uma alternativa eficiente de controle. Evidências sugerem que a resposta imune que se estabelece após a cura clínica de leishmanioses deva constituir um padrão de resposta imunológica associado à proteção, e que uma preparação vacinal deveria estimulá-la preferencialmente. Nosso grupo demonstrou que antígenos de L. (Viannia) naiffi (espécie considerada benigna) conseguem induzir respostas bem moduladas, e que soros de voluntários curados de leishmaniose tegumentar cutânea reconheceram frações desse antígeno consideradas imunodominantes. Experimentos anteriores demonstraram em hamster que a imunização intranasal com antígenos totais dessa espécie são capazes de induzir uma imunidade protetora contra L. (V.) braziliensis. O mesmo grupo já havia obtido a mesma resposta protetora utilizando o antígeno total de L. (L.) amazonensis. No entanto, sabe-se que nem todos os componentes presentes nesses antígenos estão associados à proteção e que a identificação de proteínas que sejam imunogênicas é uma etapa indispensável na formulação de uma vacina.

O objetivo deste trabalho foi identificar as proteínas imunodominantes presentes nas frações solúveis de L. (L.) amazonensis (LaAg(s)) e L.(V.) naiffi (LnAg(s)), que sejam conservadas dentro do gênero Leishmania, para formular uma vacina pan específica para o controle das leishmanioses. Primeiramente, os antígenos LnAg(s) e LaAg(s) foram subfracionados em gel de poliacrilamida e as bandas com peso molecular entre 35 e 100KDa foram extraídas e submetidas à análise por espectrometria de massa para análise proteômica. Desta análise, foram obtidas as sequências de aminoácidos, o tamanho das sequências, e a abundância das proteínas. As proteínas mais abundantes foram submetidas à análise de similaridade com proteínas de hospedeiros. As proteínas de LnAg(s) e LaAg(s) com baixa similaridade (<30%) às proteínas humanas foram analisadas por preditores de epítopos reconhecidos por linfócitos B.

Em paralelo, a predição de epítopos presentes em LnAg(s) e LaAg(s), capazes de se ligar com alta afinidade a moléculas HLA classes I e II, assim como a promiscuidade de ligação a alelos de HLA para cada proteína, foram avaliados dentre aquelas que apresentaram maior abundância e baixa similaridade. Por fim, após a análise de homologia das proteínas entre as espécies de Leishmania, foram identificadas 11 proteínas com mais homólogos. Elas apresentaram potencial de reconhecimento por linfócitos B, assim como também por componentes da resposta imune celular (como predito para a apresentação por HLA classes I e II). O potencial de ativação de linfócitos T pelos epítopos presentes nas 11 proteínas foi incrementado pela ampla capacidade de apresentação antigênica na população humana, devido à alta promiscuidade quanto à capacidade de ligação destes epítopos a alelos de HLA. Esses resultados contribuem para a identificação de antígenos com potencial de compor um protótipo vacinal capaz de induzir uma resposta imune protetora pan específica em humanos, com características imunodominantes e indutoras de resposta humoral e celular, para serem empregados no controle das leishmanioses. (AU)