Na odontologia, o biofilme formado nas linhas d'água de equipos odontológicos pode disseminar a contaminação microbiana na água. O objetivo desta pesquisa foi investigar a contaminação microbiana da água de abastecimento e de equipos odontológicos antes e após a implementação de um protocolo para melhoria e manutenção da qualidade microbiológica da água de equipos odontológicos, bem como desenvolver produtos antibiofilme com possível aplicabilidade nas linhas d'água. A carga microbiana da água de 27 torneiras e equipos (reservatórios, seringas tríplice e alta rotação) de uma clínica odontológica foi avaliada por meio do sistema Petrifilm(TM) (bactérias aeróbias totais e fungos) e meios de cultura convencionais (enterobactérias e Legionella spp.) em duas etapas distintas, sendo a segunda análise realizada após a implementação de um protocolo para melhoria e manutenção da qualidade microbiológica da água dos equipos. Ainda, as atividades antibacteriana (concentração inibitória mínima - hipoclorito de sódio, ácido cítrico, bicarbonato de sódio, cloreto de sódio, dodecil sulfato de sódio, peróxido de hidrogênio, polissorbato 20 e quitosana) e antibiofilme (biomassa total e viabilidade celular) foram determinadas in vitro a partir de substâncias e produtos com possível aplicabilidade na desinfecção de linhas d'água de equipos. As amostras de água das torneiras apresentaram carga bacteriana dentro do parâmetro estabelecido pela legislação brasileira, no entanto, as seringas tríplices e os alta rotação não. A implementação do protocolo para manutenção da qualidade microbiológica da água dos equipos demonstrou uma redução nas cargas bacteriana e fúngica apenas nos alta rotação. Enterobactérias e Legionella spp. não foram isoladas das amostras de água das torneiras e dos equipos. De acordo com a concentração inibitória mínima, o ácido cítrico, bicarbonato de sódio, cloreto de sódio, hipoclorito de sódio e peróxido de hidrogênio demonstraram as melhores atividades antibacterianas. As melhores atividades antibiofilme (biomassa total) foram do peróxido de hidrogênio a 5% (E. coli e P. aeruginosa), ácido cítrico a 30% (P. aeruginosa) e bicarbonato de sódio a 30% (S. aureus). Os produtos (Wanitox A e Wanitox B) desenvolvidos apresentaram atividade antibiofilme (viabilidade celular) contra a E. coli e S. aureus. Assim, os produtos desenvolvidos nesta pesquisa apresentaram possível aplicabilidade no enfrentamento do biofilme nas linhas d'água de equipos odontológicos, que permanece como um dos grandes desafios na odontologia. Ainda, pesquisas adicionais são necessárias para o aperfeiçoamento e aplicabilidade destes produtos