Publication year: 2024
Theses and dissertations in Portugués presented to the Universidade de São Paulo. Faculdade de Saúde Pública to obtain the academic title of Doutor. Leader: Torres, Elizabeth Aparecida Ferraz da Silva
Introdução:
As Doenças Crônicas Não Transmissíveis constituem importante problema de saúde pública, destacando-se a aterosclerose que é uma das principais causas de mortalidade global. Componentes da dieta, como o café podem modular o perfil lipídico, e contribuir na redução da hiperlipidemia. Contudo, o efeito do leite sobre estas propriedades não é claro. Objetivos:
Avaliar o efeito da adição de leite e de compostos bioativos do café em cápsula cafeinado e descafeinado em mecanismos relacionados ao metabolismo do colesterol in vitro em modelo de células intestinais Métodos: Foram adquiridos dois tipos de cápsulas comerciais de café expresso (tradicional e descafeinada) e o leite em lojas de alimentos da cidade de São Paulo, Brasil. As bebidas foram preparadas conforme descrito na embalagem em cafeteira doméstica. As bebidas à base de café foram submetidas à digestão in vitro e os compostos fenólicos foram quantificados e identificados. A atividade antioxidante foi determinada por ORAC, ABTS e DPPH. Foram avaliadas a capacidade de inibição da lipase pancreática, de ligação com ácidos biliares e de inibição da solubilização micelar do colesterol de forma in vitro. Ademais, foi realizado ensaio de permeação do colesterol por um período de 2 e 24 horas e realizado o ensaio de western blotting para determinar o conteúdo proteico dos transportadores de colesterol (NPC1L1, ABCG5 e LXR-α) em Caco-2. Resultados:
O conteúdo fenólico total variou de 168,21 a 397,38 mg equivalente a ácido clorogênico/mL. Todas as bebidas à base de café apresentaram atividade antioxidante, com destaque para as bebidas descafeinadas e com adição de leite, respectivamente. Os principais compostos bioativos foram cafeína, 5-cqa, cafeico, quinico, p-cumarico e ferulico. A adição de leite melhorou a bioacessibilidade do ácido cafeico e da cafeína. O café descafeinado teve maior efeito inibitório da lipase pancreática do que o café regular, independentemente da adição de leite. A atividade relativa a colestiramina, por sua vez, foi maior no café regular, regular com leite e descafeinado com leite na concentração 0,5 mg/mL e no regular com leite 1mg/mL. Apresentando maior capacidade de ligação com os ácidos biliares quando comparados ao padrão positivo (medicamento). Após o ensaio de permeação de colesterol em células Caco-2, os valores diferiram entre os compartimentos apical e basolateral nas três concentrações, esses valores demonstram uma tendência de redução da absorção de colesterol, independentemente das concentrações de café e adição de leite. As bebidas à base de café modularam negativamente o conteúdo proteico do NPC1L1 e positivamente LXR-α e ABCG5. Conclusão:
As bebidas à base de café tiveram efeito positivo no metabolismo do colesterol e a adição de leite contribuiu para melhorar o efeito de algumas bebidas nesse mecanismo. Contudo, essas bebidas podem ser consideradas uma importante fonte alimentar com potencial efeito hipocolesterolêmico, capaz de reduzir a captação de lipídios no intestino, podendo ser utilizado como adjuvante no controle da hipercolesterolemia. Mais estudos são necessários para elucidar a aplicação clínica desses resultados em humanos.
Introduction:
Chronic Non-Communicable Diseases are a major public health problem, especially atherosclerosis, which is one of the main causes of global mortality. Dietary components such as coffee can modulate the lipid profile and help reduce hyperlipidemia. However, the effect of milk on these properties is unclear. Objectives:
To evaluate the effect of adding milk and bioactive compounds from caffeinated and decaffeinated coffee capsules on mechanisms related to cholesterol metabolism in vitro in an intestinal cell model. Methods:
Two types of commercial espresso capsules (traditional and decaffeinated) and milk were purchased from food stores in the city of São Paulo, Brazil. The beverages were prepared as described on the packaging in a domestic coffee maker. The coffee beverages were subjected to in vitro digestion and the phenolic compounds were quantified and identified. Antioxidant activity was determined by ORAC, ABTS and DPPH. The ability to inhibit pancreatic lipase, to bind bile acids and to inhibit the micellar solubilization of cholesterol was assessed in vitro. In addition, a cholesterol permeation test was carried out for a period of 2 and 24 hours and a western blotting test was performed to determine the protein content of the cholesterol transporters (NPC1L1, ABCG5 and LXR-α) in Caco-2. Results:
The total phenolic content ranged from 168.21 to 397.38 mg chlorogenic acid equivalent/mL. All the coffee beverages showed antioxidant activity, with decaffeinated and milk-added beverages standing out, respectively. The main bioactive compounds were caffeine, 5-cqa, caffeic, quinic, p-coumaric and ferulic. The addition of milk improved the bioaccessibility of caffeic acid and caffeine. Decaffeinated coffee had a greater inhibitory effect on pancreatic lipase than regular coffee, regardless of the addition of milk. Cholestyramine activity was higher in regular coffee, regular coffee with milk and decaffeinated coffee with milk at a concentration of 0.5 mg/mL and regular coffee with milk at 1 mg/mL. It had a greater capacity to bind to bile acids when compared to the positive standard (drug). After the cholesterol permeation test in Caco-2 cells, the values differed between the apical and basolateral compartments at the three concentrations, these values showing a tendency to reduce cholesterol absorption, regardless of the concentrations of coffee and added milk. Coffee beverages negatively modulated the protein content of NPC1L1 and positively LXR-α and ABCG5. Conclusion:
Coffee beverages had a positive effect on cholesterol metabolism and the addition of milk helped to improve the effect of some beverages on this mechanism. However, these beverages can be considered an important food source with a potential hypocholesterolemic effect, capable of reducing lipid uptake in the intestine, and can be used as an adjuvant in the control of hypercholesterolemia. More studies are needed to elucidate the clinical application of these results in humans.