Apresentamos metodologia para obtençäo de linhagem de células osteoblásticas propagada a partir de tecido ósseo normal. Por meio de técnica de dispersäo enzimática as células isoladas do osso pariental de ratos recém-nascidos foram cultivadas em meio apropriado e induzidas a diferenciaçäo fenotípica e funcional. Avaliaçäo da morfologia, presença de atividade de fosfatase alcalina, produçäo de nódulos calcificados, expressäo imuno-citoquímica de proteínas colagênicas (colágeno tipo I) e näo colagênicas próprias (osteonectina e sialoproteína óssea II) do tecido ósseo comprovaram a característica osteoblástica da linhagem obtida. O sistema desenvolvido confirmou que a técnica de cultivo celular primário a partir de tecido ósseo normal é viável e origina células com as características básicas dos osteoblastos. Este estudo "in vitro" pode ser utilizado amplamente em Odontologia, em especial no estudo da fisiopatologia óssea e em testes de compatibilidade de biomateriais com o tecido ósseo