Aplicaçäo da cromatografia líquida de alta eficiência com detecçäo por U.V. na separaçäo e quantificaçäo de pesticidas organofosforados em matrizes ambientais e biológicas: otimizaçäo de parâmetros operacionais
Publication year: 1998
Theses and dissertations in Portugués presented to the Escola Nacional de Saúde Pública to obtain the academic title of Mestre. Leader:
Constitui os pesticidas organofosforados, sob o ponto de vista de saúde pública, a classe mais importante dentre os agroquímicos. Sua importância se deve a sua grande utilizaçäo e ao seu alto grau de toxicidade. A elevada incidência de casos de contaminaçäo ambiental e de intoxicaçäo humana exige a aplicaçäo de metodologia analítica abrangente e suficientemente sensível para a determinaçäo dos baixos níveis de concentraçäo observados em amostras biológicas e ambientais. As características da cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC) fazem com que este método seja um dos mais indicados para a determinaçäo multiresidual em baixos níveis de concentraçäo. Por estas razöes este método foi utilizado para a separaçäo e determinaçäo de alguns pesticidas organofosforados (paration, gution, metilparation, clorpirifos e fenitrotion) e seus metabólitos (paraoxon, p-nitrofenol, p-nitrocresol, gutoxon, metilparaoxon e fenitrotion-oxon) em uma matriz biológica (plasma) e uma ambiental (água). Para tal foi utilizado um cromatógrafo líquido modelo HP 1090, com detecçäo por espectrofotometrica (diode array). Em uma primeira etapa, a separaçäo dos pesticidas foi conseguida isocraticamente com uma mistura de água: acetonitrila 55:45 (v/v). Nesta etapa a coluna utilizada foi a de 150mm de comprimento. Entretanto, a separaçäo completa da mistura dos 11 compostos utilizados só foi obtida sob as seguintes condiçöes: fase móvel: agua: acetonitrila (gradiente näo linear variando de 90:10 a 80:20 em 15 minutos, atingindo 50:50 após 25 minutos, 40:60 após 30 minutos, mantendo-se em 40:60 até os 36 minutos e finalmente atingindo 25:75 após 45 minutos); fase estacionária, C18; coluna de 200mm com 4,6 mm de diâmetro interno e partículas de 5µm. A temperatura e a velocidade de fluxo utilizada foram respectivamente, 40ºC e 1ml/min. O método apresentou reprodutibilidade e repetibilidade menores que 5 por cento e 10 por cento respectivamente. Os coeficientes de correlaçäo obtidos utilizando-se metodologia proposta (>0,998) demonstram haver boa correlaçäo linear entre as concentraçöes utilizadas e as áreas integradas dos picos. Testes preliminares de fortificaçäo, tanto da amostra ambiental quanto da amostra biológica, indicaram recuperaçäo dos compostos em ambas as matrizes maior que 65 por cento, com exceçäo do p-nitrofenol (20 por cento). ...