As metaloendopeptidases hemorrágicas de venenos de serpentes são classificadas em uma sub-família de metaloenzimas (reprolisinas) cujos membros se estendem até os mamíferos. Participam de fenômenos patológicos e fisiológicos de grande relevância não apenas por sua ação proteolítica como através da participação de seu domínio desintegrina capaz de atuar em processos de adesão celular com inúmeras conseqüências e possíveis aplicações biotecnológicas. Todos esses aspectos justificam o amplo interesse que tem despertado o estudo dessas metaloendopeptidases ofídicas. A bothoropasina, isolada do veneno da serpente Bothrops jararaca, é uma dentre as metaloendopeptidase hemorrágicas, cuja dose mínima hemorrágica (DMH), que corresponde à dose necessária para gerar uma hemorragia de 1 cm2 na derme de coelho, é de 1mg. Esta mesma dose produz mionecrose em músculo tibial anterior de camundongo. É uma metaloendopeptidase ativa sobre substratos protéicos como a caseína e a cadeia B de insulina. Trata-se de uma glicoproteína ácida (pI 4,8), constituída por uma única cadeia polipeptídica cuja massa molecular é 48.000 Da. Sua atividade proteolítica é estabilizada na presença de cloreto de cálcio e inibida por compostos quelantes como orto-fenantrolina, EDTA e EGTA. A bothropasina é facilmente susceptível a autoproteólise e os produtos gerados podem ser detectados por eletroforese em gel de SDS-poliacrilamida. A clonagem molecular da bothropasina foi realizada a partir de uma biblioteca de cDNAs das glândulas de veneno da B. jararaca contruída com o vetor lZAPII, utilizando-se um soro monoespecífico anti-bothropasina. O clone isolado, denominado pBlueseript 8x3.3 que codifica para pró-bothopasina, contém um cDNA completo de 2333 pares de bases, que consiste de 73 nucleotídeos na extremidade 5'nâo traduzida, 1830 pares de bases na fase de leitura aberta e 430 pares de bases na extremidade 3' não traduzida. A seqüência de aminoácidos traduzida apresenta estrutura de multi-domínio consistindo de 20 resíduos no peptídeo sinal, e os seguintes domínios: pró, catalítico, tipo desintegrina e rico em cisteínas. O precursor da bothropasina apresenta alto grau de homologia com precursores da família das metaloendopeptidases de veneno e com proteínas de tecidos reprodutivos de mamíferos. A autenticidade do clone isolado foi confirmada por sequenciamento de aminoácidos de peptídeos internos oriundos da autoproteólise da bothropasina nativa....(au)