Se utilizaron sueros provenientes de conejos y terneros inmunizados con virus polio específicos no purificados (crudos) para patronizar la técnica del ensayo inmunoenzimático (ELISA).

Con base en la literatura revisada se seleccionaron dos variantes de este inmunoensayo:

ELISA captura y ELISA indirecto. Como anticuerpo de captura (AcC) se utilizó una mezcla de anticuerpos de la clase inmunoglobulinas G (IgG), provenientes de sueros inmunes anti-virus polio 1 y 2 con títulos neutralizantes NT de 1:4096 y 1:2048 respectivamente. El antígeno (Ag) fue uno de los tres tipos de virus polio semipurificado. Los sueros de conejo sirvieron como controles positivos y negativos y como conjugado se usó anti-IgG anti-conejo marcada con fosfatasa alcalina.

Los títulos NT de los sueros inmunes de conejo fueron 1:

4096 para los dos grupos de conejos que recibieron inóculos de virus polio 1 y virus polio 2 respectivamente.

Los conejos que fueron inmunizados con virus polio 3 exhibieron títulos de 1:

1024. Por la técnica de neutralización no se detectaron reacciones cruzadas, a pesar de una mínima presencia de anticuerpos (Acs) intertípicos. Trabajando con stos mismos sueros de conejo, sólo en las diluciones 1:100 o 1:160 fue posible establecer diferencias estadísticamente significativas (p < 0.05) entre sueros positivos y negativos, lo que implica que las dos técnicas empleadas (captura e indirecta), tienen poco rango de especificidad. No fue posible distinguir los anticuerpos específicos de tipo, aún después de absorber los sueros con virus heterólogos. Las diluciones de mezclas de sueros inmunes heterólogos se comportan en la misma forma que las diluciones de sueros homólogas. Finalmente, se diseñó una prueba de competencia directa o simultánea entre suero de conejo inmune monovalente (anti virus polio 1) y suero humano trivalente (con anticuerpos contra los tres tipos de virus), pero no se logró detectar anticuerpos específicos de tipo por la técnica ELISA capura