La giardiosis es una enfermedad intestinal causada por el protozoo, flagelado, Giardia el cual se encuentra a nivel mundial, en países desarrollados y en vías de desarrollo. Este tiene un cilo de vida simple con un quiste infectante y un trofozoíto vegetativo. La identificación del parásito se realiza por el análisis parasitológico generalmente en materia fecal y coprológicos seriados, líquido duodenal y biopsia intestinal. Actualmente, la detección de Giardia está basada en el desarrollo de anticuerpos policlonales y/o monoclonales anti-Giardia. La detección de antígeno de Giardia en eluídos de heces humanas utilizando anticuerpos específicos de pesos moleculares de 30 y 65 kDa se ha realizado mediante el uso de estuches inmunodiagnósticos. La presente investigación se propuso estandarizar y evaluar un ELISA "sandwich" directo utilizando una mezcla de tres anticuerpos policlonales desarrollados contra 31, 65 y 170 kDa de trofozoíto de Giardia para la captura de antígeno del parásito en eluídos de heces humanas. Los antígenos de 31, 65 y 170 kDa del parásito se obtuvieron mediante electroforesis en gel de poliacrilamida en presencia de dodecil sulfato de sodio (SDS-PAGE) y se desarrollaron, en conejo, anticuerpos policlonales anti-31, 65 y 170 kDa. Estos fueron purificados mediante precipitación secuencial con ácido caprílico y sulfato de amonio y se elaboró un conjugado con parte de los anticuerpos policlonales uniéndole a éstos la enzima fosfatasa alcalina. Se realizó una mezcla de anti-31, 65 y 170 kDa en proporción 1:1:1 respectivamente. Se estandarizó y evaluó el ELISA para la detección del antígeno de Giardia en eluídos de heces humanas. La concentración óptima de anticuerpos policlonales fue de 40 µg/ml y la de conjugado de 1:300. El valor de absorbancia (punto de corte) que diferenció una muestra negativa de una positiva fue 0.36.

Los parámetros de la prueba fueron:

sensibilidad 72 por ciento, especificidad 81 por ciento, valor predictivo positivo 68 por ciento y valor predictivo negativo 84 por ciento. Los anticuerpos policlonales monoespecíficos desarrrollados contra las proteínas antigénicas de 31, 65 y 170 kDa de trofozoíto de Giardia fueron específicos para las proteínas obtenidas después del proceso electroforético SDS-PAGE.La ELISA del estudio ofrece una sensibilidad del 72 por ciento que es igual a la obtenida con el diagnóstico parasitológico de una muestra de materia fecal. Sería importante evaluar la sensiblidad del ELISA...