Análise do potencial de virulência de amostras de Escherichia coli näo pertencentes a sorogrupos de EPEC, portadoras do gene eae e desprovidas das seqüências das sondas EAF e stx
Publication year: 2000
Theses and dissertations in Portugués presented to the Universidade Federal de Säo Paulo. Escola Paulista de Medicina to obtain the academic title of Doutor. Leader:
A lesão "attaching and effacing" é um mecanismo de virulência importante de alguns enteropatógenos bacterianos humanos, como a Escherichia coli enteropatogênica (EPEC) e a E. coli produtora de toxina Shiga (STEC) (que inclui a E. coli enterohemorrágica - EHEC), Essa lesão é caracterizada pela aderência íntima da bactéria ao enterócito, destruição das microvilosidades e formação de estruturas semelhantes a pedestais, onde com freqüência se localizam as bactérias aderidas. O teste de FAS ("fluorescent actin staining") detecta a alta concentração de filamentos de actina polimerizada presentes no enterócito, logo abaixo do sítio de aderência bacteriana. A intimina é a proteína bacteriana, codificada pelo gene eae, responsável pela aderência íntima às células hospedeiras, na lesão A/E, o receptor da intimina, denominado Tir ("translocated intimin receptor"), é um produto bacteriano que é inserido na célula hospedeira durante a infecção. Estudos imunológicos e moleculares possibilitaram a descrição de variações na porção carboxi-terminal da molécula de intimina, Os genes envolvidos na formação da lesão A/E estão localizados em uma ilha de patogenicidade denominada "locus of enterocyte effacement" (LEE). Foram descritos pelo menos dois sítios diferentes de inserção da região LEE, que estão localizados adjacentes a selC e pheU, no cromossomo de E. col K-12. Além da lesão A/E, foram descritos outros fatores que colaboram com a patogenicidade de EPEC e STEC/EHEC. Na categoria das EPECS, esses fatores compreendem a presença do plasmídio EAF ("EPEC adherence factor"), que codifica o "bundle forming pilus" (BFP) e está associado à formação do padrão de aderência localizada (AL), em algumas linhagens celulares cultivadas "in vitro". Nas STEC/EHEC, compreendem a presença de seqüências stx, relacionadas à produçäo de toxinas Shiga. A descriçäo de que amostras de E. coli FAS+, desprovidas das seqüências das sondas DNA EAF e stx, haviam sido isoladas de casos de diarréia em algumas regiöes geográficas, colocou uma questäo sobre o papael dessas amostras na doença diarréica. Este estudo foi realizado para caracterizar o potencial de virulência de 59 amostras de E. coli que eram portadoras do gene eae e näo apresentavam similaridade com as sondas genéticas EAF e stx(E.coli eae + EAF-stx-), que haviam sido previamente isoladas e crianças com e sem diarréia em Säo Paulo. Foram pesquisados vários marcadores genotípicos e fenotípicos. Os ensaios...(au)