As peçonhas ofídicas são misturas protéicas complexas. As proteínas e peptídeos representam cerca de 95 por cento de sua composição, com funções efetoras, estruturais, plasmáticas, enzimáticas e tóxicas que podem afetar o sistema biológico das suas vítimas. A espécie Bothrops erythromelas, cuja peçonha foi investigada neste trabalho, também é conhecida como jararaca-da-seca, rosada, avermelhada ou malha-de-cascavel no nordeste brasileiro onde se encontra amplamente distribuída. Sua peçonha apresenta atividades coagulante e proteolítica maiores que outras peçonhas de serpentes do gênero Bothrops além de uma potente atividade hemorrágica com a particularidade de não exibir atividade tipo-trombina. A marcante atividade procoagulante desta peçonha foi atribuída à presença dos ativadores dos fatores II e X da coagulação. Uma proteína ativadora da protrombina (berythrom) foi isolada e caracterizada a partir da peçonha total da serpente B. erythromelas. Alíquotas de peçonha total (3,4 mg) foram submetidas a purificação em sistemas FPLC e HPLC. O ativador de protrombina foi purificado em uma coluna Resource-S (Pharmacia) e sua homogeneidade foi confirmada em SDS-PAGE. Esta metaloproteinase apresentou uma cadeia única com 78 kDa, sem atividade hemorrágica "in vivo". O berythrom hidrolisou protrombina nos primeiros 5 minutos de incubação. Um Km de 60 nM foi obtido a partir dos estudos cinéticos preliminares da atividade enzimática deste ativador. O RNA total foi extraído das glândulas de veneno da B. erythromelas e uma biblioteca de cDNA foi construída em plasmídeo pGEM-llZf(+) (Promega). O cDNA que, codifica para este ativador foi amplificado da biblioteca por PCR a partir de oligonucleotídeos degenerados correspondentes a seqüência N-terminal da proteína madura. O produto de PCR com 1.700 pb foi seqüênciado e sub-clonado no vetor de expressão pAE derivado do pRSETA para a produção de proteína recombinante em cepa BL2l(DE3) de E. coli