O papel do linfócito T CD4+ na lesäo de isquemia/reperfusäo renal num modelo experimental de insuficiência renal aguda
Publication year: 2001
Theses and dissertations in Portugués presented to the Universidade Federal de Säo Paulo. Escola Paulista de Medicina. Curso de Medicina to obtain the academic title of Doutor. Leader:
A lesão induzida por isquemia-reperfusão (IR) é o principal fator etiológico da insuficiência renal aguda de rins nativos e de rins transplantados onde contribui para surgimento de rejeição aguda a nefropatia crônica do enxerto. A IR especialmente a fase de reperfusão desencadeia uma resposta inflamatória estereotipada que contribuí para a alteração funcional vista nos órgãos pós-isquêmicos. A infiltração de linfócitos T, bem como o estímulo à síntese de citocinas relacionadas a sua função, têm sido descritas após episódios de IR, porém o seu significado permanece pouco esclarecido. Tivemos portanto, como objetivo avaliar o papel do linfócitos T CD4+ (LT4) na lesão de IR num modelo de insuficiência renal aguda. Utilizamos camundongos C57BL/6, que foram submetidos à isquemia renal através do clampeamento do pedicuro renal bilateralmente por 45 minutos, seguidos de reperfusão (grupo 2). Para avaliar a participação do LT4 submetemos um grupo de animais a depleção destas células pela administração de 50mg, IP, do anticorpo depletante GK 1.5 48 horas antes do episódio de IR (grupo 3). Utilizamos também camundongos geneticamente deficientes de moléculas da classe II do complexo maior de histocompatibilidade (MHC II), que exibem depleção acentuada de LT4, que foram submetidos também ao episódio de IR (grupo 4). Animais submetidos à cirurgia sem clampeamento dos pedículos compuseram o grupo 1. Os animais foram sacrificados 1, 2 e 5 dias após a reperfusão quando foi colhido sangue para dosagem de uréia e retirados os rins. No tecido renal realizamos análise morfométrica para necrose e regeneração tubular, bem como imuno-histoquímica para CD4, CD11b e PCNA ("proiiferating cell nucleic antigen"). Avaliamos a expressão de mRNA da cadeia b (Cb) do receptor da célula T, gIFN, granzima B e cicloxigenase-2 (COX-2) em tecido renal pela reação de polimerização em cadeia (PCR). Por citometria de fluxo de esplenócitos, observamos depleção de acentuada de células CD4+ dois dias após o tratamento com GK 1.5(97, 4 por cento do normal) e que havia recuperação para cerca de 30 por cento das células animais normais três e quatro dias após o tratamento. No grupo 4 os animais exibiam apenas 3.4 por cento das células CD4+ dos animais normais. Os grupos depletados de LT4(grupos anti-CD4 e "knockout") apresentaram níveis de uréia sérica significante menores do que o grupo 2, um e dois dias após o episódio de IR. Aos cinco dias não havia diferença entre a uréia dos...