A fosfotirosina proteina fosfatase de baixa massa molecular relativa (LMW-PTP) é uma fosfohidrolase de distribuiçäo ubíqua na natureza, presente nas células como duas isoenzimas (IF1 e IF2), as quais säo codificadas por três alelos. Estas isoenzimas diferem entre si na regiäo compreendida entre os resíduos de aminoácido de 40-73, exibindo diferentes afinidades pelo substrato, sensibilidade a moduladores e inibidores. A IF2 está envolvida na mitogênese e rearranjo do citoesqueleto induzido pelo fator de crescimento derivado de plaquetas (PDGF). Em fibroblastos normais, o aumento da IF2 resulta em decréscimo na taxa de proliferaçäo celular. Neste trabalho realizamos a clonagem e expressäo da IF2. O RNA total extraído de pâncreas humano foi usado para RT-PCR com "primers" oligo-dT. O fragmento da LMW-PTP foi amplificado utilizando os "primers" 5'-GAAATGCAGGATCCTCAGG-3' e 5'-GGACCATGGCGGAACAGGCTACCAAGTCCG-3' e clonado no vetor pUC18. A seqüência da IF2 foi confirmada pelo seqüênciamento automático de DNA (Sistema ABI). A LMW-PTP foi sub-clonada no vetor pRSET B (sem cauda de Histidina) e usado para transformar bactérias BL21 DE3 para produçäo em larga escala. A expressäo da IF2 foi induzida por IPTG, sendo as colônias positivas confirmadas por PCR, SDS-PAGE e atividade enzimática. A fim de avaliar o papel da LMW-PTP na reversäo fenotípica tumoral-normal e na transformaçäo maligna induzida por oncogenes foram utilizados os sistemas: 1) as linhagens celulares C6/ST1 e C6/P7 derivadas de glioma de rato quimicamente induzido, sendo a variante ST1 sensível e a P7 resistente a glucocorticóides (GC); 2) linhagens celulares expressando oncoproteinas do vírus polioma (antígenos "middle" e "large" T), mutadas ou näo. A atividade enzimática foi determinada em pH 5,0 usando o p-nitrofenil fosfato como substrato ('37 graus C', 20 min), nas seguintes condiçöes: a) ausência de inibidores (fosfatase ácida total, FAT);...