Desenvolvimento de preparações vacinais de dna do Toxoplasma gondii e avaliação da resposta imune protetora
Publication year: 2002
Theses and dissertations in Portugués presented to the Instituto Oswaldo Cruz to obtain the academic title of Doutor. Leader: Vieira, Joseli Lannes
A toxoplasmose é uma doença infecciosa causada pelo protozoário intracelular Toxoplasma gondii. Acredita-se que cerca de 30-60 por cento da população mundial estejam infectados por este parasita. Uma das estratégias de redução da transmissão do T. gondii ao homem seria a vacinação dos animais domésticos e daqueles usados para alimentação...O gene foi seqüenciado, confirmando sua identidade com a seqüência depositada do Gene Bank. A transfecção de células Cos7 levou à expressão de proteína de 30kDa reconhecida por anticorpo específico. Além disso, camundongos BALB/c imunizados com dose de 50 e 100 ug de DNA do pcDNA3-SAG1/P30 apresentaram resposta imune humoral específica. A segunda estratégia consistiu em imunizar camundongos BALB/c via intramuscular com baixas doses de um "cocktail" de DNA (25-50ug) contendo o gene da SAG1/P30 e o gene codificando a seqüência terminal 196-561 da proteína de rotria ROP2... A imunização de camundongos BALB/c com uma, duas ou três doses de 100ug de DNA (pcDNA3-BG) resultou em resposta imune humoral do perfil Th1 com predomínio de IgG2as. Soros de animais imunizados com pcDNA3-BG, mas não de animais injetados com o vetor, reconheceram diferentes bandas (21-117kDa) do antígeno nativo do T. gondii, mostrando que a biblioteca genômica contém diversas seqüências de DNA do T. gondii que foram eA proliferação de células T estimuladas com antígenos nativos do T. gondii foi acompanhada pela secreção de IFN-y, na ausência de níveis detectáveis de IL-4. De modo importante, a imunização com pcDNA3-BG induziu de modo dose-dependente resposta protetora de longa duração quando os animais foram desafiados com uma dose letal de parasitos da cepa RH do T. gondii. Estes resultados dão suporte a pesquisas futuras objetivando identificar novos genes envolvidos na indução de proteção de modo a desenvolver uma vacina de DNA multigênica anti-T. gondii. Em conjunto, nossos resultados apontam para a possibilidade de utilização de novas estratégias para o desenvolvimento de vacinas eficientes anti-T. gondii.