Face ao objetivo fundamental deste trabalho de estabelecer e padronizar teste capaz de detectar e avaliar quantitativamente a presença de resíduos não-inativados de toxina pertussis (TP) em vacina pertussis (VP) e/ou tríplice (DTP), selecionamos a cultura de células CHO, pois, além de se enquadrar perfeitamente na regra dos 3 Rs, principalmente em termos de possível substituição do teste in vivo, é amplamente usada como linhagem celular modelo para o estudo dos efeitos celulares da TP comparativamente com os causados pela toxina colérica (TC), de características químicas e biológicas muito semelhantes à TP. Assim, as alterações morfológicas de aglomeração celular (efeito clustering) ou de alongamento celular induzidos, respectivamente, pela TP e TC, foram quantificadas e os seus mecanismos de ação estudados, confirmando-se o da TC e propondo-se o da TP, concluindo-se, ao contrário do até agora supostamente admitido, que são epifenômenos mediados por segundos mensageiros diferentes, pois confirmamos o papel do AMPc no alongamento e sugerimos o envolvimento do GMPc no clustering, demonstrando, outrossim, a participação fundamental do Oligômero B, fração molecular da TP, neste fenômeno morfológico, além de apresentarmos evidências sugestivas da participação de proteínas intracelulares diretamente conectadas com o citoesqueleto, tais como, a actina, tubulina e integrinas, na formação do clustering. Finalmente, a correlação entre os níveis de resíduos de TP - não inativada nas vacinas VP e DTP, encontradas in vivo através do Teste de Sensibilização à Histamina e in vitro em células CHO, definitivamente demonstrou a validade deste último teste, não só como complementar aos testes in vivo, mas também como possível substituto destes últimos no Controle de Qualidade das vacinas DTP. Ressalte-se que nas concentrações de TP capazes de induzir o clustering, não mostraram efeitos citotóxicos, avaliados através da análise do crescimento celular, da eficiência de clonagem, do índice mitótico e do ensaio cometa.