Variações estruturais de heparinas de baixo peso molecular(enoxaparinas) de diferentes fontes comerciais

Publication year: 2004
Theses and dissertations in Portugués presented to the Universidade Federal de São Paulo. Escola Paulista de Medicina. Curso de Biologia Molecular to obtain the academic title of Doutor. Leader:

Estudos da estrutura e farmacologia de enoxaparinas (heparinas de baixo peso molecular), de diversos lotes da Aventis Pharma e de outras procedências foi realizado. Estes compostos são comercializados no Brasil com o nome de Clexane (Aventis Pharmaceutica) e Cutenox (Instituto Biochimico Ltda). A enoxaparina é preparada da heparina por benzilação dos ácidos urônicos seguida de -eliminação por tratamento alcalino, resultando na formação de fragmentos insaturados nos terminais não redutores. A enoxaparina é fracionada por filtração molecular em HPLC em 5 a 10 frações com massas moleculares variando de 1,3 a 9,0 kDa diferindo entre si pelo número de unidades dissacarídicas. Assim as frações identificáveis vão de um tetrassacarídeo até um octadecassacarídeo, dependendo da enoxaparina analisada. Análise de 4 lotes diferentes da Aventis mostraram que o grau de insaturação varia entre as quatro enoxaparinas, assim como a proporção relativa das frações. Comparando qualquer um dos lotes da Aventis com a enoxaparina da Cutenox mostra que a última possui maior número de frações e as mesmas apresentam maior resolução entre si. Outras sete enoxaparinas de diferentes fabricantes foram também analisadas mostrando de novo que cada enoxaparina é diferente da outra em relação ao grau de insaturação, número e proporção relativa dos fragmentos. Variações também foram observadas em relação a massa molecular média, analisado por eletroforese em gel de poliacrilamida. Ao contrário nenhuma diferença significativa foi observada entre as enoxaparinas em relação a susceptibilidade a heparinase e heparitinase II da Flavobacterium heparinum, indicando que o tratamento químico manteve a estrutura original da heparina de partida, exceto pela presença de insaturação e menor peso molecular. Fracionamento dos diversos fragmentos e análise da relação da absorção a 200 nm(grupos carboxila), e 230 nm(insaturação), mostrou que 80 a 100 por cento dos fragmentos são insaturados...

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