O Herpesvírus bovino tipo 1 (BHV-1), membro da subfamília Alphaherpesvirinae, gênero Varicellovirus, está disseminado mundialmente e tem sido motivo de grande preocupação para criadores e autoridades sanitárias de vários países. Este vírus pode causar rinotraqueíte infecciosa bovina (IBR), vulvovaginite pustular infecciosa (IPV), balanopostite pustular infecciosa (IPB), conjuntivite e infecções sistêmicas, sendo o aborto uma das consequências mais frequentes. O impacto econômico desta enfermidade é observado pelo retardo do crescimento de animais jovens, menor produção leiteira, morte embrionária e fetal, abortamento, com maior frequência no segundo e terceiro trimestres de gestação, eficiência reprodutiva de matrizes e touros reduzidas, além das restrições ao comércio internacional de animais vivos e seus produtos tais como sêmen e embriões, previstas no Código Internacional de Saúde Animal. Planos de controle e erradicação do vírus têm sido aplicados em alguns países da União Européia através da utilização de vacinas com genes deletados, que permitem a diferenciação entre animais naturalmente infectados e vacinados. O presente estudo teve como objetivo desenvolver ferramentas de diagnóstico e caracterização do BHV-1 baseadas na análise do DNA, que auxiliassem no aprimoramento dos programas de controle e erradicação desse vírus nos rebanhos bovinos. Para isso, foi desenvolvido um teste de nested PCR fluorescente para um fragmento do gene timidina quinase (TK) que permite a detecção e discriminação entre BHV-1 e BHV-5. Foram colhidas 100 amostras de gânglios trigemelares e leucócitos de fêmeas bovinas abatidas em frigorífico, sem histórico de vacinação prévia para BHV-1 e que não apresentavam sinais clínicos da doença. Foi possível diagnosticar por nested PCR fluorescente em 32 amostras de leucócitos e BHV-1 e/ou BHV-5 em 56 gânglios trigemelares, posteriormente confirmados por sequenciamento direto...