Análise de mecanismos envolvidos no efeito inibitório sobre a replicação do HIV-1 resultante da ativação de TLR2

Alves, Bruno Cister

Pacientes infectados pelo HIV-1 apresentam maior permeabilidade intestinal, a qual permite a passagem para a circulação sangüínea de elevada quantidade de produtos microbianos, fenômeno conhecido por translocação microbiana. [...] Dentre os produtos translocados encontram-se ligantes dos receptores tipo Toll (TLR), os quais reconhecem componentes microbianos e podem, portanto, ser ativados por uma grande variedade de patógenos. A ativação de TLR desencadeia uma complexa cascata de sinalização, induz a síntese de diversas citocinas, e modula a função de células dendríticas, macrófagos e linfócitos, células-alvo da infecção pelo HIV-1. Em estudos realizados em nosso laboratório vimos que a ativação de TLR2 resulta na inibição da replicação do HIV-1 em linfócitos e macrófagos, fenômeno este mediado pela citocina IL-10 e por beta-quimiocinas. No entanto, tendo em vista a potente resposta imunitária inata desencadeada pela ativação de TLRs, com a produção de ampla variedade de produtos inflamatórios, era possível que outros fatores, como a citocina IL-27, um potente inibidor da replicação do HIV-1, estivessem envolvidos na inibição da replicação viral gerada pela ativação deste receptor. Neste trabalho, investigamos se a IL-27 estaria envolvida na inibição da replicação induzida pela ativação de TLR2. Para tanto, tratamos macrófagos primarios humanos com agonistas de TLR2 para analisar a expressão e produção de IL-27 por qPCR e ELISA. Nossos dados mostram que Pam3CSK4, ligante do dímero TLR2/TLR1, promoveu um aumento de expressão de EBI3 e p28 (subunidades da IL-27), e que Pam2CSK4 aumentou a expressão de EBI3...

HIV-1 infected patients present increased intestinal permeability, which allows thepassage of microorganisms or microbial antigens to the blood, phenomenon known asmicrobial translocation. [...] Amongst the translocated products areseveral agonists of Toll like receptor (TLR), which recognize microbial components and may,therefore, be activated by a large variety of pathogens. TLR activation triggers a complexsignaling pathway, induces the synthesis of several cytokines, and modulates the function ofdendritic cells, macrophages and lymphocytes, cells that are target for HIV-1 infection.Studies performed in our laboratory show that TLR2 activation results in inhibition of HIV-1replication in lymphocytes and macrophages, a phenomenon mediated by IL-10 and beta-chemokines. However, because of the potent innate immune response triggered by TLRactivation, resulting in the production of a wide variety of inflammatory molecules, it ispossible that other factors contribute to reduce the HIV-1 replication in this condition. In thisstudy, we investigate whether the cytokine IL-27, a potent inhibitor of HIV-1 replication,could be involved in inhibition of HIV-1 replication upon activation of TLR2. Thus, humanprimary macrophages were treated with different TLR2 agonists in order to analyze theexpression and production of IL-27 by qPCR and ELISA. We found that Pam3CSK4increased the expression of EBI3 and p28 (IL-27 subunits), and Pam2CSK4 increased theexpression of EBI3. The same ligands augmented the production of soluble IL-27p28, asmeasured by an ELISA kit that detects only the IL-27p28 subunit...