Atividade antifúngica e citotoxicidade do jato de plasma frio sob pressão atmosférica
Publication year: 2016
Theses and dissertations in Portugués presented to the Universidade Estadual Paulista "Júlio de Mesquita Filho" to obtain the academic title of Doutor. Leader: Koga ito, Cristiane Yumi
As doenças fúngicas representam grande desafio para a área médica e odontológica
devido à crescente prevalência e aumento da resistência aos antifúngicos. O plasma
frio sob pressão atmosférica (PFPA) é uma mistura gasosa contendo partículas
carregadas, radicais livres e radiação. Sua potencial aplicação em doenças
infecciosas foi relatada, contudo a literatura carece de estudo sistemático sobre o
efeito antifúngico, mecanismos de ação e potencial citotóxico. Neste trabalho foi
avaliado o efeito antifúngico do PFPA sobre Candida albicans através de ensaios em
células planctônicas e biofilmes, efeitos sobre a integridade de parede celular e
membrana plasmática, morfogênese, produção de exoenzimas, aderência às células
epiteliais e efeito no tratamento in vivo de lesões de candidose oral induzida em
modelo murino. Ainda, avaliou-se o efeito do PFPA sobre culturas de Trichophyton
rubrum, além de efeitos sobre capacidade de adesão de conídios. Ainda, o potencial
citotóxico foi investigado usando células epiteliais. PFPA em modo de tensão
contínuo (MC) foi capaz de reduzir a aderência de C. albicans às células epiteliais,
modular a transição levedura-hifa na cepa SC 5314 e comprometer a viabilidade de
biofilmes. PFPA-MC se mostrou citotóxico em parâmetros efetivos frente a biofilmes
de C. albicans. Porém, não foi observado efeito citotóxico quando o PFPA foi
utilizado em modo de tensão pulsada (MP). A exposição ao PFPA-MP reduziu a
invasão de C. albicans no epitélio in vivo. O PFPA-MP foi capaz de afetar o
crescimento de T. rubrum a partir de 10 minutos e de afetar a sua capacidade de
aderência. Assim, conclui-se que PFPA apresenta efeito antifúngico contra C.
albicans e T. rubrum e é capaz de interferir em fatores de virulência de ambos os
micro-organismos(AU)
Fungal diseases represent a great challenge to the medical and dental areas, due to
the increasing prevalence and antifungal resistance. Atmospheric pressure plasma
jet (APPJ) is a gaseous mixture containing charged particles, free radicals and
radiation. Its potential application in infectious disease has been reported, however
there is still a lack of a systematic study on the antifungal effect, mechanism of action
and citotoxicc potential. The general aim of this project was to evaluate the antifungal
effect of APPJ on Candida albicans in planktonic and biofilm cultures, effects on cell
wall and cell membrane integrity, morphogenesis, exoenzymes production,
adherence to epithelial cells and in vivo effect in the treatment of oral candidosis in
murine model will be performed. The effect of APPJ on Trichophyton rubrum cultures
and on adherence capability were also evaluated. The cytotoxic potential was
evaluated in vitro. APPJ in continuous tension mode (CM) was able to reduce the
adherence and yeast-hyphae transition in C. albicans SC 5314 and to decrease
biofilm viability. APPJ-CM showed cytotoxic effect in the parameters effective to C.
albicans biofilm. Conversely, no cytotoxic effect on epithelial cells were observed
when pulsed (PM) plasma jet was used. In vivo tests showed that APPJ-PM was able
to prevent C. albicans invasion to the epithelium. T. rubrum cultures were affectd by
APPJ-PM after 15 minutes of exposure and conidia adherence was impaired by 10
minutes exposure. In conclusion, APPJ showed antifungal effect against C. albicans
and T. rubrum and can also impair virulence factors in both microorganisms(AU)