Avaliação da correlação entre peroxidação lipídica e o perfil de marcadores inflamatórios em pacientes com Diabetes mellitus tipo 2, dislipidemia e periodontite crônica
Publication year: 2012
Theses and dissertations in Portugués presented to the Universidade Estadual Paulista. Faculdade de Odontologia to obtain the academic title of Doutor. Leader: Orrico, Silvana Regina Perez
O presente estudo teve por objetivo avaliar os níveis locais e sistêmicos de peroxidação lipídica (LPO) e sua correlação com o perfil de marcadores inflamatórios, locais e sistêmicos em com Diabetes mellitus (DM) tipo 2, dislipidemia e periodontite crônica, comparando-os a indivíduos sem diabetes. Além disso, buscou-se propor um método validado para avaliar o malondiadeído (MDA) no fluido sulcular gengival de sítios saudáveis e doentes.
A amostra foi constituída de 120 pacientes com doença periodontal crônica divididos em 4 grupos:
Grupo1 (DM descompensado); Grupo2 (DM compensado); Grupo3 (sem diabetes com dislipidemia); Grupo 4 (sistemicamente saudável). Toda a amostra foi submetida a exame periodontal completo, exame físico e avaliação laboratorial para verificação da glicemia de jejum, hemoglobina glicada (HbA1c), insulina, proteína C-reativa e perfil lipídico. O exame periodontal consistiu na avaliação do índice de placa visível, do índice de sangramento marginal, da posição da margem gengival, da profundidade de sondagem, do sangramento à sondagem e do nível clínico de inserção. Para todos os grupos foram coletadas amostras de fluido sulcular gengival (FSG) (4 sítios sem periodontite e 4 sítios com periodontite) e de sangue para obtenção do plasma sanguíneo. Os níveis de peroxidação lipídica representados pelo MDA, avaliado por HPLC, e pelo LDL oxidado (LDLox), avaliado por ELISA, foram quantificados no fluido sulcular gengival e no plasma. Foram avaliadas ainda as citocinas (IL)-1E, -2, - 4, -5, -6, -7, -8, -10, -12, -13 e fator de necrose tumoral α (TNF-α) no FSG e no plasma. Foi possível determinar e validar o método de avaliação no fluido sulcular gengival, com alta precisão, sendo que os coeficientes de variação intra- e inter-dias encontrados foram abaixo de 6.3% e 12.4%, respectivamente. O método foi considerado sensível e capaz de detectar o MDA em pequenas quantidades, sendo o limite de quantificação (S/N = 5) de 0.03 μM, permitindo avaliação deste marcador no fluido de sítios saudáveis. Foi observado que os sítios com doença periodontal apresentavam-se com valores maiores de MDA do que os sítios saudáveis. Os resultados mostraram que o grupo 1 apresentou maior severidade da doença periodontal quando comparado aos demais grupos, em especial quanto ao sangramento à sondagem, profundidade de sondagem≥6mm, nível de inserção clínica≥5mm e supuração. Em relação aos parâmetros de LPO local e sistêmico, os grupos com diabetes apresentaram maiores níveis de peroxidação quando comparados aos grupos sem diabetes, sendo que o grupo 1 apresentou diferença significativa também em relação ao grupo 2. Em relação às citocinas inflamatórias no FSG, foi observado que o TNF-α, IL-6 e IL-10 estavam significativamente aumentadas no fluido de pacientes com diabetes, sendo esta diferença maior no grupo 1. Foram verificadas correlações positivas e significantes entre os níveis de peroxidação lipídica e citocinas no FSG (IL6, IL-10, TNF-α) bem como com parâmetros de doença periodontal, dentre estes sangramento à sondagem, profundidade de sondagem ≥ 6mm, nível de inserção clínica ≥ 5mm e presença de supuração. Já no plasma, a expressão das citocinas seguiu um padrão decrescente do grupo 1 ao grupo 4 tanto para citocinas pró- quanto anti-inflamatórias, sendo esta diferença significante para (IL)-1E, -4, -6, -8 e TNF-α. Esta diferença ocorreu em maior magnitude no grupo 1, embora nos pacientes portadores de diabetes com adequado controle metabólico os níveis destas citocinas também estivessem mais elevados em relação aos pacientes saudáveis. Os níveis de LPO plasmática apresentaram correlação intermediária e positiva (p<0.0001) com níveis de IL1- β(0.50), TNF-α.(0.40) e IL-6(0.40). Concluimos que a peroxidaçao lipídica pode ser um mecanismo importante na expressão aumentada de marcadores inflamatórios e maior severidade da doença periodontal no paciente com DM e dislipidemia
The aim of this study is to evaluate the levels of the lipid peroxidation and its correlation with systemic and local inflammatory markers profile in patients with type 2 diabetes mellitus (DM2) dyslipidemia and chronic periodontitis compared to systemically healthy patients. We also aimed to quantify a specific product of the lipid peroxidation process, malondialdehyde (MDA), in gingival crevicular fluid and to describe the validation of this method in this matrix using HPLC.