Aislamiento y caracterización de compuestos fibrinogenolíticos presentes en el extracto acuoso floral de Brownea macrophylla
Isolation and characterization of fibrinogenolytic compounds present in the aqueous floral extract of Brownea macrophylla
Publication year: 2015
Theses and dissertations in Español presented to the UNIVERSIDAD CENTRAL DE VENEZUELA to obtain the academic title of Especialista. Leader: Brazón, Josmary
El uso de plantas medicinales es una práctica muy antigua usada por los seres humanos desde el origen de sus culturas. Dichas plantas tienen una gran cantidad de compuestos con actividad en diferentes sistemas biológicos, como es el caso de la hemostasia. En la medicina popular venezolana las mujeres en edad reproductiva que padecen de menorragia, desorden menstrual caracterizado por una pérdida de sangre de más de 100 mL por ciclo o un sangrado continuo por más de 7 días; ingieren infusiones de flores de “rosa de montaña” o Brownea macrophylla para controlar la pérdida de sangre. Sin embargo, se ha encontrado que el extracto acuoso floral de esta planta, además de presentar componentes pro coagulantes que podrían ser usados como tratamiento para la menorragia también contiene componentes que degradan al fibrinógeno, proteína central en la coagulación de la sangre, precursor de la malla de fibrina, la cual detiene el sangrado cuando se interrumpe el flujo continuo en el sistema vascular. Esta degradación del fibrinógeno podría impedir la formación de la malla de fibrina y por ende exacerbar la pérdida de sangre en mujeres con menorragia o podría formar una malla de fibrina resistente a la degradación por los componentes del sistema fibrinolítico y de esta manera contribuir a controlar la menorragia. Por tal razón, el objetivo de este estudio fue aislar y caracterizar componentes fibrinogenolíticos presentes en el extracto acuoso floral de Brownea macrophylla. Los resultados de este trabajo demostraron que el extracto acuoso no coaguló fibrinógeno y por ende fue incapaz de formar la malla de fibrina. El extracto acuoso se fraccionó inicialmente por Sephadex G-50 (exclusión molecular) obteniendo 6 fracciones (S1 a S6) y la fracción con mayor actividad fibrinogenolítica fue S4. La actividad de esta fracción fue inhibida por EDTA, Benzamidina, PMSF y AIA, siendo este último el más eficiente. Luego, la fracción S4 se recromatografió a través de una columna IMAC-ZN Separopore (afinidad por metalo proteasas) obteniéndose dos fracciones S4A y S4B, donde S4A fue la más activa degradando fibrinógeno. A esta fracción se le determinó el pH y temperatura óptima, siendo 3 y 37 ºC respectivamente. En resumen, los componentes fibrinogenolíticos son glucoproteínas tipo α-fibrinogenasa de masas moleculares de 38,32 y de naturaleza distinta a las metalo proteasas. Al tratar de relacionar los hallazgos obtenidos en este trabajo con el uso que se le da a las flores de Brownea macrophylla en la medicina tradicional venezolana se puede concluir que los compuestos fibrinogenolíticos presente en el extracto acuoso floral de Brownea macrophylla no contribuyen a controlar la menorragia, si no que por el contrario podrían ser capaces de incrementar la pérdida de sangre, ya que el fibrinógeno degradado por el extracto, no es capaz de polimerizar en presencia de trombina para formar una malla de fibrina. Sin embargo, como la proporción de los componentes fibrinogenolíticos con respecto a los demás componentes presentes en el extracto es menor, es posible que no incremente la pérdida de sangre ya que, las mujeres que toman la infusión de flores de Brownea macrophylla no lo han reportado.