Las plantas se han utilizado desde tiempos antiguos para el tratamiento de todo tipo de afecciones, considerándose en el tiempo actual como una alternativa para la medicina tradicional natural que está fuera del alcance de la población en países como el nuestro. La presente investigación tuvo como principal objetivo determinar la actividad hemolítica in vitro de ocho plantas de uso medicinal en Guatemala (Byrsonima crassifolia, Bixa orellana, Lippia graveolens, Litsea guatemalensis, Petiveria alliacea, Phlebodium pseudoaureum, Smilax domingensis, Solanum nigrescens). Estudios previos han demostrado que estas plantas contienen saponinas, las cuales son un grupo de glucósidos solubles en agua y que contienen características tensoactiva, hemolíticas y citotóxicas (Bruneton, 2001). Se comprobó la presencia de saponinas en las ocho plantas estudiadas, por medio de pruebas cualitativas iniciando con la prueba de espuma. Posteriormente se realizó la identificación por medio de análisis cromatográfico, comparándose con estándares de saponinas esteroidales. La cuantificación de las mismas se realizó por medio de espectrofotometría obteniéndose para Byrsonima crassifolia 1.78%±0.222%, Bixa orellana 0.80%±0.04%, Lippia graveolens 0.21%±0.06%, Litsea guatemalensis 3.19%±0.10%, Petiveria alliacea 0.92%±0.04%, Phlebodium pseudoaureum 1.06%±0.05%, Smilax domingensis 0.21%±0.006% y Solanum nigrescens 1.42%±0.007%. La actividad hemolítica de los extractos de las plantas determinada cualitativamente en agar sangre, no se presentó en ninguno de los extractos estudiados, al compararla con un estándar de saponinas que presentó un halo de hemólisis de 4mm de diámetro. Así mismo se realizó otro ensayo cualitativo en tubo, el cual demostró la presencia de hemólisis en cinco de las ocho plantas de estudio, la cuales son Bixa orellana, Byrsonima crassifolia, Petiveria alliacea, Phlebodium pseudoaureum y Smilax domingensis La cuantificación de la hemólisis de los extractos en estudio, se realizó por medio de espectrofotometría a dos diferentes temperaturas, 25°C y 37°C y a diferentes concentraciones, en donde se obtuvo un mayor porcentaje de actividad hemolítica con los extractos de Solanum nigrescens, Petiveria alliacea y Bixa orellana. También se demostró que la hemólisis aumenta mientras aumenta la concentración del extracto. Se calculó para cada extracto la concentración a la cual ocurre el 50% de hemólisis (CH50), para establecer diferencias de hemólisis a dos temperaturas: 25°C y 37°C obteniendo una correlación entre la concentración de los extractos y la actividad hemolítica. A 25°C solamente Bixa orellana, Petiveria alliacea y Solanum nigrescens tienen importante actividad hemolítica; mientras que a 37°C tienen improtancia Bixa orellana, Litsea guatemalensis, Petiveria alliacea y Solanum nigrescens. En este estudio, la actividad hemolítica de las saponinas de las plantas pudo ser comprobada, sin embargo no ha sido específica por lo que es importante profundizar en el tema dentro de los límites de la lisis y la toxicidad a los eritrocitos, ya que son plantas de uso popular medicinal.