Las enterobacterias son el grupo más común de bacilos Gram negativo cultivados en los laboratorios clínicos y se encuentran entre las bacterias patógenas más comunes dentro de los hospitales. Las bacterias patógenas más frecuentes en Guatemala son Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae y Enterobacter cloacae y para contrarrestarlas se han utilizado antibióticos betalactámicos para los cuales estas enterobacterias han desarrollado diversos mecanismos de defensa, siendo la producción de enzimas de tipo beta-lactamasa el más frecuentes (Brooks, 1999, Coyle, 2006, Itzep, 2005). Las beta-lactamasas son enzimas producidas por bacterias que inactivan los antibióticos betalactámicos al hidrolizar el anillo beta-lactámico de los mismos, siendo este el mecanismo de defensa más efectivo de las enterobacterias contra estos antibióticos. Por lo tanto las enzimas beta-lactamasas de espectro extendido (BLEE) son enzimas que fenotípicamente se caracterizan por conferir resistencia a penicilinas, cefalosporinas (incluyendo tercera y cuarta generación) y monobactames, pueden ser inhibidas por inhibidores de beta-lactamasas, son capaces de hidrolizar las oxiaminocefalosporinas (cefotaxima, el ceftazidima y la ceftriaxona) y son inhibidas por el ácido clavulánico (Coyle, 2006). La proyección de generar nuevas opciones para contrarrestar las infecciones producidas por este tipo de bacterias multiresistentes conlleva a pensar en la posibilidad de utilizar medicina alternativa, como la fitoterapia, para poder atacar a este tipo de microorganismos. Guatemala es un país muy rico en la flora medicinal, razón por la cual se han realizado diversos estudios en donde se ha demostrado que plantas como el pericón, el nance, la guayaba, la mejorana, zarzaparrilla, entre otras tienen actividad antibacteriana satisfactoria. El objetivo del presente estudió fue contribuir con posibles alternativas de tratamiento antibiótico natural para las infecciones que son causadas por enterobacterias productoras de BLEE; así mismo proponer y estandarizar la determinación de la concentración mínima inhibitoria (CIM) por la técnica de la microdilución en placa utilizando como revelador de viabilidad bacteriana el reactivo MTT (bromuro de 3-[4,5-dimetiltiazol-2-il]-2,5- difeniltetrazolium) y de esta forma poder evaluar cepas clínicas productoras de BLEE contra extractos de 9 plantas nativas de la región y determinar la CIM de los mismos. Para la estandarización del método se utilizó un estándar de ampicilina y se enfrentó a cepas de 24 horas de crecimiento de Escherichia coli ATCC 25922. Después de una incubación de 16- 18 horas a 37°C se reveló la viabilidad bacteriana con MTT a una absorbancia de 492nm. Se realizó una curva de acumulación de medias para obtener los valores finales de la técnica y se determinó que el punto de corte es de -0.020 ± 0.04 nm. Con lo que respecta a la evaluación de los extractos alcohólicos de las plantas, todos los extractos seleccionados para el estudio presentaron actividad antibacteriana en estudios previos con una CIM menor a 250 mg/dl. Para la técnica de microdilución en placa se utilizó una concentración de 200μg/ml de extracto. Ninguno de los 9 extractos evaluados presentó actividad antibacteriana contra las cepas de Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae y Enterobacter cloacae provenientes de asilamientos clínicos y productoras de BLEE. Es importante que se realice este ensayo con una concentración de extracto más alta, ya que es probable que no pudo detectarse la actividad de los mismos por evaluarse en una concentración demasiado baja, aunque dada la naturaleza de multiresistencia de estas bacterias no extraña un resultado negativo.