Alterações nas fibras musculares e tecido ósseo de ratos submetidos à aplicação de hormônio do crescimento (GH) e treinamento de força muscular

Publication year: 2017
Theses and dissertations in Portugués presented to the Universidade Estadual de Campinas to obtain the academic title of Doutor. Leader: Belangero, William Dias

Resumo:

O objetivo do estudo foi observar as alterações nas fibras musculares e tecido ósseo de animais submetidos à aplicação do hormônio do crescimento (GH) e realização de um protocolo de treinamento de força (ST). Foram utilizados 40 animais machos, com 60 dias de idade, da linhagem Wistar, distribuídos em quatro grupos: controle (C), controle e aplicação de GH (GHC), treinamento de força (T) e treinamento de força com a aplicação de GH (GHT). O protocolo de treinamento físico (TF) foi composto por quatro séries de 10 saltos aquáticos, 3x/semana e sobrecarga de 50% do peso corporal, durante quatro semanas. Foi aplicado GH via intraperitoneal na dosagem de 0,2 UI/Kg para os grupos GHC e GHT e solução fisiológica (0,9% de cloreto de sódio) para o C e T. Após quatros semanas de TF, os animais foram eutanasiados e retiradas amostras do músculo Sóleo, além da tíbia e fêmur. No músculo, foram produzidos cortes histológicos com 5µm de espessura e corados com hematoxilina-eosina (HE) e nicotinamida adenina dinucleotídeo tetrazólio redutase (NADH-TR). Já no osso, foram medidos os valores de densidade mineral óssea (DMO), resistência óssea (F-max) e realizados os cortes por microtomografia computadorizada (MCT) e análise por espectroscopia Raman. Foi observado que tanto o GH quanto o TF foram capazes de gerar aumento do diâmetro das fibras musculares (FM) do músculo Sóleo (C:31,81±6,35; GHC:36,88±6,38; T:38,38±6,94; GHT:36,89±7,16). Além disso, quando analisada a tipagem, houve aumento significativo (p<0,05) somente nas FM de contração rápida (C:33,78±7,78; GHC:37,80±6,03; T:38,53±6,94; GHT:37,98±7,65), quando comparado às lentas (C:25,93±6,66; GHC:26,95±8,03; T:26,24±6,90; GHT:27,20±5,77). Já na tíbia, foi observado que todos os grupos experimentais demonstraram aumento na variável DMO (C=0,110±0,005; GHC=0,134±0,05; T=0,127±0,004; GHT=0,133±0,008 g/cm²), no entanto, somente o grupo GHT demonstrou diferença estatisticamente significativa em comparação com o grupo controle (p<0,05). Além disso, não foi verificada diferença estatística para a variável obtida na F-max. Na avaliação da MCT, em todos os grupos ocorreu aumento do número de trabéculas (Tb.N) (C=1,10±0,22; GHC=1,79±0,07; T=1,91±0,04; GHT=1,91±0,09), quando comparados com o grupo C (p<0,05). Quando analisado o fêmur, verificou-se que houve o aumento mais acentuado dos componentes minerais ósseos no grupo T, para todas as variáveis obtidas pelo Raman. Além disso, para os animais submetidos à aplicação de GH, houve redução na variável densidade mineral óssea (DMO) (p<0,05). Por fim, os animais que receberam aplicação de GH, demonstraram maior F-max, porém, sem significância estatística (p>0,05). Conclui-se que, tanto o GH quanto o TF foram capazes de gerar aumento do diâmetro das FM do músculo Sóleo e promover aumento da DMO e Tb.N na tíbia. Porém, não foi verificada diferença significativa para variável F-max. Por fim, no fêmur, os animais que receberam aplicação de GH demonstraram diminuição da DMO e o treinamento de força isolado foi capaz de promover aumento dos compostos de cálcio, fosfato, amido e colágeno do tecido ósseo(AU)

Abstract:

The aim of the present study was to observe the changes in the muscle fibers and bone tissue of animals after application of growth hormone (GH) and performing a strength training protocol (ST). In total, 40 male Wistar rats, 60 days old, were used, divided into four groups: control (C), control and application of GH (GHC), strength training (T), and strength training with the application of GH (GHT). The physical training protocol (PT) was composed of four series of 10 jumps in water, 3x/week, with an overload of 50% of body weight for four weeks. GH was administered intraperitoneally at a dose of 0.2 IU/Kg to the GHC and GHT groups and saline (0.9% sodium chloride) to the C and T groups. After four weeks of PT, the animals were euthanized and samples taken from the Soleus muscle, in addition to bones of tibia and femur. In the muscle, histological sections were produced with a thickness of 5?m and stained with hematoxylin-eosin (HE) and nicotinamide adenine dinucleotide tetrazolium reductase (NADH-TR). In the bone, the values of bone mineral density (BMD), bone strength (F-max), Micro Computed Tomography (MCT) and analysis by Raman Spectroscopy, were obtained. It was observed that both the GH and PT were able to generate increased diameter of MF in Soleus muscle (C:31.81±6.35; GHC:36.88±6.38; T:38.38± 6.94; GHT:36.89±7.16). Moreover, when analyzing the type, a significant increase (p<0,05) was found only in the fast twitch MF (C:33.78±7.78; GHC:37.80±6.03; T:38.53±6.94; GHT:37.98±7.65) when compared to the slow twitch (C:25.93±6.66; GHC:26.95±8.03; T:26.24±6.90; GHT:27.20±5.77). In the tibia, an increase in the BMD variable was observed in all experimental groups (C=0.110±0.005; GHC=0.134±0.05; T=0.127±0.004; GHT=0.133±0.008g/cm²), however, only the GHT group demonstrated a statistically significant difference compared to the control group (p<0.05). In addition, no statistical difference was observed for the F-max variable. For MCT, all experimental groups presented an increase in the number of trabeculae (Tb.N) (C=1.10±0.22; GHC=1.79±0.07; T=1.91±0.04; GHT=1.91±0.09), when compared with group C (p<0.05). When the femur was analyzed, a more pronounced increase in the bone mineral components was verified in the T group, for all the variables obtained by the Raman. In addition, for animals submitted to GH supplementation, there was a reduction in the variable bone mineral density (BMD) (p <0.05). Finally, the animals that received GH supplementation presented a higher F-max, but without statistical significance (p> 0.05). It was concluded that both GH and ST were able to promote increases in diameter of MF in Soleus muscle and BMD and Tb.N in the tibia. However, no significant difference was observed for the F-max variable. Finally, in the femur bone, that animals that received GH supplementation demonstrated a decrease in BMD and the strength training alone was able to promote increased calcium, phosphate, amide, and collagen compounds in bone tissue(AU)

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