La utilización de las plantas medicinales está fundamentado en el conocimiento popular; cada vez se requiere la búsqueda constante de principios activos nuevos que promulguen una manera de combatir la resistencia bacteriana convirtiéndose en una alternativa terapéutica; por tal motivo el objetivo de la investigación fue evaluar la actividad antimicrobiana in vitro del extracto hidroetanólico de hojas de Origanum majorana en cepas de Proteus spp, para lo cual fue necesario complementarlo con etapas previas como un estudio etnobotánico a través de encuestas a 89 informadores clave del sector de San Francisco de la ciudad de Riobamba obteniendo un nivel de uso significativo del 21% que sirvió para la selección de Origanum majorana para el estudio. En una etapa posterior se obtuvo el extracto hidroetanólico y evaluación de parámetros físico químicos y organolépticos; seguido de la caracterización fitoquímica evidenciando la presencia de fenoles, flavonoides, terpenos y saponinas en dicho extracto. Culminando con la evaluación de su actividad antimicrobiana in vitro por la técnica de difusión en disco en cepas de Proteus spp a concentraciones de 25%,50%, 75% y 100% revelando que su actividad es directamente proporcional a la concentración del extracto. Se concluyó que la Origanum majorana es una de las plantas medicinales más usadas por la población estudiada y que el extracto hidroetanólico de sus hojas presentan actividad antimicrobiana. (AU)