Caracterização molecular das espécies e marcadores de resistência nos mosquitos vectores da malária nas áreas pulverizadas da cidade de Pemba, Província de Cabo Delgado
Ano de publicação: 2013
Teses e dissertações em Português apresentado à Instituto Nacional de Saúde para obtenção do título de Mestre. Orientador: Brazil, Reginaldo Pessanha
A malária é uma das mais importantes doenças parasitárias do homem. Em Moçambique, é a causa mais comum de atendimento nas consultas externas, bem como de admissão nas Unidades Sanitárias. Os principais vectores em Moçambique são An.gambiae s.s., An. Arabiensis e An. funestus s.s. As principais formas de controlo de vectores em Moçambique são Pulverização Intra Domiciliária (PIDOM) (usando piretróides e DDT) e distribuição de redes mosquiteiras em campanhas massivas. Estes métodos de controlo são eficazes, mas a exposição prolongada das gerações de mosquitos a estes insecticidas podem rapidamente desenvolver resistência. O estudo das espécies dos vectores da malária é um pré-requisito de uma planificação e monitoramento para um Programa de Malária de sucesso. A eficácia da PIDOM também depende da susceptibilidade dos vectores ao sinsecticidas usados. No entanto, não têm sido feitos muitos estudos para a identificação, determinação da distribuição e estado de resistência dos vectores aos insecticidas usados na PIDOM. O objectivo deste estudo foi verificar a existência de resistência ao sinsecticidas usados na PIDOM, determinar, em termos moleculares as espécies vectores da malária, a frequência da mutação kdr e o polimorfismo de An. Gambiae a partir do gene cpr. Foram utilizados como amostra mosquitos da F1 produzidos emMarçoaJunhode2009. Averificação da resistência foi realizada por testes de susceptibilidade usando “kit” da OMS; a identificação dos vectores e a presença de marcadores moleculares para resistência aos insecticidas piretróides e DDT foi analisada por PCR usando iniciadores específicos para cada objectivo e a determinação do polimorfismo foi feita por sequenciamento do gene cpr. Neste trabalho, houve suspeita de resistência ao DDT, no entanto os testes do marcador kdr mostraram que estes mosquitos continuam susceptíveis e que esta suspeita de resistência pode não ser devido á resistência cruzada mas a um outro mecanismo. Os machos usados na pesquisa do gene cpr mostraram pouco polimorfismo uma vez que apenas dois indivíduos foram heterozigotos. O controlo de vectores de malária é uma medida que pode assegurar maior eficiência na prevenção da doença, o resultado deste trabalho fornece conhecimento sobre as espécies de mosquitos vectores de malária proporcionando ao PNCM dados para o desenvolvimento e implementação de uma estratégia racional, integrada e maior atenção aos planos de monitorização entomológica em Moçambique.
Malaria is one of the most important parasitic diseases of man. In Mozambique, it is the most common cause of attending outpatient consultations as well as admission to health facilities. The main vectors in Mozambique are An.gambiae s.s., An. Arabiensis and An. Funestus s.s. The main forms of vector control in Mozambique are Intra-Home Spraying (PIDOM) (using pyrethroids and DDT) and distribution of mosquito nets in massive campaigns. These control methods are effective, but prolonged exposure of mosquito generations to these insecticides can quickly develop resistance. Studying malaria vector species is a prerequisite for planning and monitoring for a successful Malaria Program. The effectiveness of PIDOM also depends on the susceptibility of the vectors to the used sinsecticides. However, many studies have not been done to identify, determine the distribution and resistance status of vectors to the insecticides used in PIDOM. The aim of this study was to verify the existence of resistance to sinsecticides used in PIDOM, to determine, in molecular terms, malaria vector species, the frequency of kdr mutation and An. Gambiae polymorphism from the cpr gene. F1 mosquitoes produced in March to June 2009 were tested. Resistance testing was performed by susceptibility testing using the WHO kit; vector identification and the presence of molecular markers for resistance to pyrethroid sinsecticides and DDT were analyzed by PCR using primers specific for each objective and polymorphism determined by sequencing of the cpr gene. In this work, resistance to DDT was suspected, however tests of marker kdr showed that these mosquitoes remain susceptible and that this suspicion of resistance may not be due to cross resistance but to another mechanism. Males used in cpr gene research showed little polymorphism since only two individuals were heterozygous. Malaria vector control is a measure that can ensure greater efficiency in disease prevention. The result of this work provides insight into malaria vector mosquito species by providing PNCM with data for the development and implementation of a rational, integrated and broader strategy. Attention to entomological monitoring plans in Mozambique.