Caracterização molecular das espécies e marcadores de resistência nos mosquitos vectores da malária nas áreas pulverizadas da cidade de pemba, província de cabo delgado -moçambique

Ano de publicação: 2013
Teses e dissertações em Português apresentado à Instituto Oswaldo Cruz para obtenção do título de Mestre. Orientador: Brazil, Reginaldo Pessanha

Caracterização molecular das espécies e marcadores de resistência nos mosquitos vectores da malária nas áreas pulverizadas da cidade de pemba, província de cabo delgado – moçambique A malária é uma das mais importantes doenças parasitárias do homem. Em Moçambique, é a causa mais comum de atendimento nas consultas externas, bem como de admissão nas Unidades Sanitárias. Os principais vectores em Moçambique são An.gambiae s.s., An.arabiensis e An.funestus s.s. As principais formas de controlo de vectores em Moçambique são Pulverização Intra Domiciliária (PIDOM) (usando piretróides e DDT) e distribuição de redes mosquiteiras em campanhas massivas. Estes métodos de controlo são eficazes, mas a exposição prolongada das gerações de mosquitos a estes insecticidas podem rapidamente desenvolver resistência. O estudo das espécies dos vectores da malária é um pré-requisito de uma planificação e monitoramento para um Programa de Malária de sucesso. AeficáciadaPIDOMtambémdependedasusceptibilidadedosvectoresaosinsecticidasusados.No entanto, não têm sido feitos muitos estudos para a identificação, determinação da distribuição e estado de resistência dos vectores aos insecticidas usados na PIDOM. O objectivo deste estudo foi verificar a existência de resistência ao sinsecticidas usados na PIDOM, determinar, em termos moleculares as espécies vectores da malária, a frequência da mutação kdr e o polimorfismo de An. gambiaea partir do gene cpr. Foram utilizados como amostra mosquitos da F1 produzidos em Março a Junhode2009. Averificação da resistência foi realizada por testes de susceptibilidade usando “kit” da OMS; a identificação dos vectores e a presença de marcadores moleculares para resistência aos insecticidas piretróides e DDT foi analisada por PCR usando iniciadores específicos para cada o bjectivo e a determinação do polimorfismo foi feita por sequenciamento do gene cpr. Neste trabalho, houve suspeita de resistência ao DDT, no entanto os testes do marcador que demostraram que estes mosquitos continuam susceptíveis e que esta suspeita de resistência pode não ser devido á resistência cruzada mas a um outro mecanismo. Os machos usados na pesquisa do gene cpr mostraram pouco polimorfismo uma vez que apenas dois indivíduos foram heterozigóticos. O controlo de vectores de malária é uma medida que pode assegurar maior eficiência na prevenção da doença, o resultado deste trabalho fornece conhecimento sobre as espécies de mosquitos vectores de malária proporcionando ao PNCM dados para o desenvolvimento e implementação de uma estratégia racional, integrada e maior atenção aos planos de monitorização entomológica em Moçambique.
Malaria is one of the most important parasitic diseases in humans. In Mozambique malaria is the most common cause of care in outpatient and admission in health facilities. The main malaria vectorscontrolin Mozambique are An. gambiae s.s., An. Arabiensis and An. funestus s.s.. The malaria vector control is mainly through indoor residual spraying (IRS) campaigns (with pyrethroids and DDT) and distribution of long-lasting insecticide nets (LLIN). These methods of control are effective. However, prolonged exposure of generations of mosquitoes to insecticides can quickly develop resistance. The specific study of malaria vectors is a prerequisite of a planning and monitoring for a successful Malaria Program. The IRS efficacy also depends on vector susceptibility to insecticide in use. However, there have been few studies for identification and determination of the distribution state of resistance of vectors to insecticides used on IRS. The objective of this study was to verify the existence of resistance to insecticides used in IRS, determine in molecular terms the malaria vector species, the frequency of kdr mutation and the An. Gambiae polymorphism from cpr gene. It was used F1 mosquitoes produced from March to June of 2009.Verification of the resistance was performed by susceptibility testing using "kit" from WHO; PCR was conducted to determine the species and molecular markers for insecticide resistance to pyrethroids and DDT. Specific primers were used for each objective. Polymorphism was performed by cpr gene sequencing. The results showed a possibility of resistance to DDT, but the kdr markers test revealed that these mosquitoes were still susceptible and that possibility of resistance may not be due to cross resistance but to another mechanism. The males used on cpr gene research, showed little as only two individuals were heterozygous. Malaria vector control is a measure that can ensure a major efficiency in disease prevention. The results of this research provide knowledge about malaria vector species which in turn may allow the NMCP to use recent data to develop and implement rational and integrated strategies and focusing on entomological monitoring plans for resistance to insecticides in use.

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