Estudo de polimorfismo de genes PKLR e VDR na população de Moçambique
polymorphism study FOR VDR gene and the population of Mozambique

Ano de publicação: 2010
Teses e dissertações em Português apresentado à Instituto Oswaldo Cruz para obtenção do título de Mestre. Orientador: Morais, Milton Osorio

As doenças infecciosas constituem um dos principais problemas de saúde no continente Africano, especialmente na África Subsariana, da qual Moçambique faz parte. A participação de fatores genéticos na susceptibilidade dos humanos às doenças infecciosas é um fato. A identificação de marcadores genéticos de susceptibilidade ou resistência a estas doenças constitui um ponto importante do processo de compreensão dos mecanismos de interação entre agentes patogénicos e o hospedeiro humano, o que poderá permitir a melhoria na abordagem preventiva e terapêutica destas doenças. Estudos de associação envolvendo genes ligados ao metabolismo e ao sistema imune têm revelado a relação entre determinados genótipos e a susceptibilidade ou resistência a doenças infecciosas como hanseníase, malária e tuberculose. Estas duas últimas contribuem em grande medida para a morbi-mortalidade na população Africana, particularmente na África Subsariana. O presente trabalho teve como objetivo realizar uma análise descritiva de polimorfismos de base única (SNPs) em dois genes candidatos à associação com doenças infecciosas, nomeadamente o gene da enzima piruvato quinase (PKLR) e o do receptor da vitamina D (VDR). Foram determinadas as frequências alélicas, genotípicas e haplotípicas de quatro SNPs, dois do gene PKLR (rs8847 e rs1052176) e dois do gene VDR (rs4760658 e 152228570), numa amostra composta por 395 indivíduos não relacionados recrutados em três regiões de Moçambique. A genotipagem foi realizada por PCR-RELP e PCR em tempo real. As frequências dos alelos de maior prevalência foram 0,76 (rs8847G); 0,6 (rs1052176C); 0,88 (154760658A) e 0,85 (r52228570C). Os SNPs do PKLR apresentavam frequências genotípicas desviadas do equilíbrio de Hardy-Weinberg. A comparação entre as frequências obtidas no presente estudo com as de outras populações de diferentes regiões geográficas e grupos étnicos revelou que, na maioria dos casos, as frequências eram semelhantes às observadas em outras populações de origem Africana e diferentes das de populações Europeias, Americanas e Asiáticas para os quatro SNPs. Os haplótipos mais frequentes formados entre os SNPs de PKLR (rs8847/rs1052176) foram G/A e G/C, com 38% cada um, e entre os de VDR (rs4760658/152228570) foi o A/C, com 75,7%. Não foi observada evidência de desequilíbrio de ligação entre os SNPs de ambos os genes. Os resultados deste estudo representam uma primeira caracterização destes polimorfismos na população de Moçambique, podendo ser úteis para o planejamento de possíveis estudos de associação com doenças infecciosas
Mozambique is a country situated in Sub-Saharan Africa, where infectious diseases are one of the major health concerns. The contribution of genetic factors to human susceptibility to these diseases is now evident, and the identification of genetic markers associated with disease susceptibility or resistance is an important step in understanding the mechanisms of host- pathogen interaction. Furthermore, the use of these markers in clinical practice can help develop new strategies for disease prevention and treatment. Associations between single nucleotide polymorphisms (SNPs) in genes involved in metabolism and the immune system have been reported in different studies, with some genotypes linked to susceptibility or resistance to infectious diseases such as leprosy, malaria, and tuberculosis. Malaria and tuberculosis significantly contribute to morbidity and mortality in Africa, particularly in the Sub-Saharan region. The aim of this study was to describe polymorphisms of the pyruvate kinase (PKLR) and vitamin D receptor (VDR) genes, which have been previously reported to be associated with infectious diseases. Four SNPs were studied in a sample of 395 unrelated individuals recruited from three different regions of Mozambique. Two polymorphisms were from the PKLR gene (rs1052176 and rs8847) and two from the VDR gene (152228570 and rs4760658). The samples were genotyped using PCR-RFLP or real-time PCR. Allele, genotype, and haplotype frequencies were determined, and linkage disequilibrium analyses were performed. The allele frequencies found were 0.76, 0.60, 0.88, and 0.85 for the most prevalent alleles rs8847G, rs1052176C, rs4760658A, and rs2228570C, respectively. The genotype frequencies of the PKLR SNPs showed deviations from the expected Hardy- Weinberg equilibrium conditions. For all loci studied, the genotype frequencies were, in most cases, similar to those previously reported in other African populations but significantly different from those found in American, European, and Asian populations. The most frequent haplotypes for PKLR (rs8847/rs1052176) were G/A and G/C, with 38% each, and for VDR (rs4760658/rs2228570), the most common haplotype was A/C, with 76%. The SNPs were not in linkage disequilibrium in either gene. These results represent an initial characterization of these SNPs in the Mozambican population and can be useful for planning future association studies on infectious diseases.

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